Tesis doctoral de Javier Encinar Del Dedo
En nuestro laboratorio estamos interesados en el estudio y caracterización de proteínas involucradas en la reorganización de la pared celular y su relación con la morfogénesis y la polaridad celular, usando la levadura schizosaccharomyces pombe como modelo. Una búsqueda en el genoma de s. Pombe (wood et al., 2002) reveló la existencia de dos endoglucanasas pertenecientes a la familia gh81 (eng1 y eng2). Eng1 contiene una secuencia señal para su secreción y un dominio rico en ser/thr. En nuestro laboratorio hemos demostrado que esta endo-b-1,3-glucanasa es necesaria para la degradación del septo primario durante la separación celular en s. Pombe (martín-cuadrado et al., 2003). Por el contrario, eng2 carece de secuencia señal, indicando que podría ser una proteína citoplasmática; esta proteína está implica en la transición al crecimiento bipolar y la endólisis de la pared del asca. eng2+ codifica una proteína con actividad endoglucanasa específica para uniones b(1,3) (martín-cuadrado et al., 2008), pero carece de secuencia señal, indicando que se trata de una proteína citoplasmática. Usando la proteína de fusión eng2-gfp, hemos confirmado que eng2 se localiza en el citoplasma de la célula como puntos dinámicos. Ya que las glucanasas son normalmente proteínas extracelulares que ejercen su función sobre la pared celular, una de las cuestiones más interesantes era determinar su función en esta localización. Para responder a esta cuestión, se generaron mutantes carentes de este gen para analizar el fenotipo celular. Mutantes eng2¿ tienen defectos en la transición del crecimiento monopolar a bipolar y los parches de actina se localizan de forma mayoritaria en el polo viejo de las células. En s. Pombe, la activación del crecimiento por el polo nuevo (generado durante la división celular) es un proceso coordinado que está regulado por el citoesquelo de actina y los microtúbulos. A este proceso se le conoce con el nombre de new end take off o neto, varias proteínas tales como tea1, tea3, mod5, tea4, for3, están implicadas en el mismo y son necesarias para que se desarrolle de forma adecuada (martin and chang, 2005). El estudio de estas proteínas en el mutante eng2¿ ha permitido demostrar que algunas de ellas presentan defectos en su funcionalidad. Curiosamente, su ortólogo en s. Cerevisiae (eng2/acf2) ha sido identificada como una proteína necesaria para la reorganización del citoesqueleto de actina in vitro (lechler and li, 1997), indicando que eng2 podría tener un papel en la reorganización del ciotesqueleto de actina durante el ciclo celular. además, la expresión de eng2+ en s. Pombe se induce durante esporulación siendo esencial para la disolución de la pared del asca y la dispersión de las esporas durante esta parte del ciclo de vida.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización de la b(1,3)-endoglucanasa eng2 en schizosaccharomyces pombe. dehiscencia y crecimiento polarizado«
- Título de la tesis: Caracterización de la b(1,3)-endoglucanasa eng2 en schizosaccharomyces pombe. dehiscencia y crecimiento polarizado
- Autor: Javier Encinar Del Dedo
- Universidad: Salamanca
- Fecha de lectura de la tesis: 25/06/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Carlos Rodríguez Vázquez De Aldana
- Tribunal
- Presidente del tribunal: María del pilar Perez gonzalez
- Manuel Muñiz guinea (vocal)
- María isabel Geli fernández-peñaflor (vocal)
- María angeles De la torre ruiz (vocal)