Tesis doctoral de Carmen Luisa Garcia De Insausti
Se realizó el aislamiento y caracterización de las células de 20 membranas amnióticas. De cada ma se obtuvo un promedio de 123±12×106 células epiteliales (haec) y 5.3×106 células mesenquimales (hamsc). Las heac expresaron ssea (1, 3 y 4), y tra (1-60 y 1-81). Las hamsc expresaron cd73, cd90, cd105 y no cd34, cd45, cd14 ni cd19. Ambas fueron negativas para hla dr y positivas para transcriptos de nanog, oct-4 y sox-2. En los cultivos primarios las haec mostraron menor capacidad de auto-renovación y proliferación que las hamsc, y en los sub-cultivos desarrollaron transición epitelio-mesénquima. Todas las haec mostraron potencialidad para diferenciarse en células de las tres capas germinales (neuroectodérmicas, hepatocíticas y cardiomiocíticas), algunas para diferenciación osteogénica y adipogénica, y ninguna para condrogénica. Todas las hamsc se diferenciaron hacia líneas osteogénicas, adipogénicas y condrogénicas. en conclusión, la ma representa un reservorio de células madre pluripotenciales y multipotenciales inmunológicamente privilegiadas. abstract: in this study we determine the quantity and quality of amnion cells after isolation and culture from 20 placentas. Following our protocol, primary yields were 123 ±12 x 106 haecs and 5.3×106 hamscs. Flow cytometric characterization showed expression of ssea (1, 3 and 4) and tra (1-60 and 1-81) in haecs. Hamsc expressed cd73, cd90, cd105 and none cd45, cd34, cd14, cd19. Both cells types were negative for hla-dr and exhibited nanog, oct-4 and sox-2 transcripts. In primary cultures haecs showed slower proliferation and less clonogenic capacity than hamscs, in sub-cultures they exhibited epithelial mesenchymal transition. All haecs samples were induced to differentiate into neuroectodermal, hepatic and cardiomiocitic cells, while osteogenic y adipogenic capacity varied between them. All hamscs samples exhibited osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation capacity. in conclusion, term amnion may be a useful source of pluripotent and multipotent stem cells that possess a degree of immune privilege.
Datos académicos de la tesis doctoral «Aislamiento y caracterización de las células madre de la membrana amniótica. una nueva fuente para terapia celular e inmunomodulación«
- Título de la tesis: Aislamiento y caracterización de las células madre de la membrana amniótica. una nueva fuente para terapia celular e inmunomodulación
- Autor: Carmen Luisa Garcia De Insausti
- Universidad: Murcia
- Fecha de lectura de la tesis: 08/05/2012
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- José María Moraleda Jiménez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: salvador Martínez pérez
- augusto Silva gonzalez (vocal)
- Majado martínez m. juliana (vocal)
- damian García olmo (vocal)