Tesis doctoral de Guadalupe Penzol Alonso
En esta tesis se han abordado los problemas relacionados con la preparacion de derivados de renina y lactasa que pudieran ser utiles como catalizadores en tecnología de la leche. Es decir, derivados donde todas las enzimas esten muy fuertemente unidos al soporte para que no se produzca liberacion de las enzimas ni de sus subunidades en el alimento, derivados de la renina muy activos frente a un substrato macromolecular como la k-caseina y derivados de diferentes -galactosidasas (glicosiladas, dimericas, tetramericas) muy activos y altamente estabilizados. se desarrollaron nuevos metodos bioquimico fisicos de modificacion de proteinas via fase solida. Es decir, modificaciones para modular la actividad y estabilidad de la enzima intimamente asociados a su proceso de inmovilizacion: modificaciones de las enzimas durante y despues de la inmovilizacion e incluso modificaciones previas pero siempre dirigidas a optimizar la inmovilizacion y la modificacion posterior. Los resultados mas significativos son los siguientes: i.- La utilizacion de soportes que promovian pocos impedimentos estericos y la inmovilizacion de la renina a traves de sus cadenas glicosiladas como brazos espaciadores pudimos obtener derivados inmovilizados que conservaban el 33% de su actividad caseinolitica, ii.- La combinacion de un proceso de aminacion controlada de la -galactosidasa de aspergillus y el diseño de procesos de union multipuntual y entrecruzamiento con cadenas glicosiladas nor permite estabilizaciones de 1000 veces con respecto a la enzima aminada y de mas de 20 veces con respecto a la enzima nativa y iii.- La estabilizacion conjunta de estructura cuaternaria y estructura terciaria que hemos logrado por inmovilizacion multipuntual de la -galactosidasa de kluyveromices fragilis sobre geles de agarosa nos permitio preparar derivados mas de 1000 veces mas estables que la enzima nativa.
Datos académicos de la tesis doctoral «Diseño de herramientas bioquimicas para la ingenieria molecular de derivados inmovilizados de renina y -galactosidasas.«
- Título de la tesis: Diseño de herramientas bioquimicas para la ingenieria molecular de derivados inmovilizados de renina y -galactosidasas.
- Autor: Guadalupe Penzol Alonso
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1996
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- José Manuel Guisán Seijas
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José Vicente Sinisterra Gago
- Antonio Ballesteros Olmo (vocal)
- Martinez Honduvilla José Carlos (vocal)
- José Luis Garcia Lopez (vocal)