Tesis doctoral de Arguelles Sanchez M. Eladia
En este trabajo abordamos la caracterizacion genetica y bioquimica de una actividad carboxipeptidasica, denominada carboxipeptidasa ysps de la levadura de fision schizosaccharomyces pombe que libera leucina de sustratos peptidicos tales como el sustrato cbz-gly-leu.Hemos purificado el enzima empleando distintos pasos cromatograficos y hemos descubierto que el enzima es un oligomero. El enzima muestra gran afinidad por la leucina en el extremo carboxilo terminal, siempre que el penultimo aminoacido sea pequeño y sin carga. El valor de la km para los sustratos cbz-gly-leu, cbz-gly-gly-leu, cbz-ala-leu son de 6,7 mm, 6 mm y 20 mm, respectivamente. la carboxipeptidasa ysps pertenece al grupo de las metaloproteasas, como se deduce del comportamiento que muestra con distintos inhibidores tipicos de proteasas y de iones metalicos. el enzima es una glicoproteina, con tres sitios potenciales de glicosilacion, como se dedujo tras realizar distintas digestiones con endo h. hemos obtenido anticuerpos que reconocen especificamente a la carboxipeptidasa ysps en un extracto crudo de la levadura de fision. mediante mutagenesis con ems, se aislo una cepa deficiente en actividad carboxipeptidasica que porta con una mutacion cromosomica y recesiva, y afecta al gen estructural del enzima. tambien comenzamos la caracterizacion molecular de la carboxipeptidasa ysps y hemos aislado plasmidos recombinantes de una genoteca que son capaces de complementar la mutacion previamente aislada.
Datos académicos de la tesis doctoral «Analisis bioquimico, genetico y molecular de una carboxipeptidasa de la levadura de fision schizosaccharomyces pombe.«
- Título de la tesis: Analisis bioquimico, genetico y molecular de una carboxipeptidasa de la levadura de fision schizosaccharomyces pombe.
- Autor: Arguelles Sanchez M. Eladia
- Universidad: Oviedo
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1996
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Suarez Rendueles M. Paz
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Santiago Gascon Muñoz
- Rosario Cueva Noval (vocal)
- Carlos Hardisson Rumeu (vocal)
- Isabel Lopez Calderon (vocal)