Purificacion y caracterizacion de una isoforma de proteina quinasa c de manto de mytilus galloprovincialis lmk.

Tesis doctoral de Mercado Vianco Luis Alberto

Las proteinas quinasas a traves de la fosforilacion de sustratos regulan las respuestas fisiologicas celulares tanto a nivel citosolico como nuclear. las diferentes isoformas de proteina quinasa c han sido caracterizadas en mamiferos y clasificadas en 3 grupos: las clasicas (cpkc) que son dependientes de dag, ca2+ y fosfatidil l-serina, las nueva (npkc) que son dependientes de dag y pl, e independientes de ca2+, y las atipicas (apkc) que solo son dependientes de ps. Las cpkc y las npkc son sensibles a esteres de forbol, como el pma, esta molecula se une a la quinasa en el mismo sitio que el dag, que es clave para su maxima actividad quinasa. en invertebrados la pkc ha sido muy poco estudiada y destacan los trabajos de sossin y col(1991,1993) quienes han purificado ap1 i y ap1 ii, la primera es una isoforma de molusco similar a las cpkcbi y bii y la segunda a la isoforma npkce, de mamiferos. En m.Galloprovincialis barcia y cols.(1997) describieron la presencia de peptidos que eran reconocidos por anticuerpos contra las isoformas a,b y — de mamiferos, ademas de actividad pkc sobre sustratos clasicos para esta quinasa. Con estos antecedentes y considerando la universalidad de la familia de las pkc en diferentes especies de ubicación filogeneticamente distante, se planteo como hipotesis la existencia de una isoforma de pkc en manto de mejillono que podria tener una amplia distribucion en sus diferentes tejidos y que ademas podria ser estudiada en hemocitos, como modelo biologico de la respuesta inmune en invertebrados. mediante tres pasos cromatograficos sucesivos: columna de intercambio anionico (de52), gel filtracion (s-200) y cromatografia de adsorcion en hidroxilapatito (htp), se purifico un peptido simple de aproximadamente 105 kda de peso molecular (p105), con actividad quinasa de tipo npkc, es decir, dependiente de pma y ps, que ademas tiene la capacidad de autofosforilacion sin mediar la estimulacion de cofactores lipidocos. Se d

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Purificacion y caracterizacion de una isoforma de proteina quinasa c de manto de mytilus galloprovincialis lmk.«

  • Título de la tesis:  Purificacion y caracterizacion de una isoforma de proteina quinasa c de manto de mytilus galloprovincialis lmk.
  • Autor:  Mercado Vianco Luis Alberto
  • Universidad:  Santiago de compostela
  • Fecha de lectura de la tesis:  17/12/2001

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Ramos Martinez Juan Ignacio
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: esperanza Cerdan villanueva
    • Antonio Villalba garcia (vocal)
    • Antonio Figueras huerta (vocal)
    • (vocal)

 

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