Tesis doctoral de Pablo Casares Proaño
Se identificó una bacteria aislada de salchichón como lactobacillus plantarum mediante las galerías de identificación api 50 chl para lactobacillus. Esta bacteria crece en óptimas condiciones en medio de cultivo mrs, presentando una cinética de crecimiento típica de muchas bacterias lácticas. el uso de la prensa de french, resultó ser un método adecuado para la ruptura celular y para la obtención de un extracto celular con actividad leucina aminopeptidasa (lap). Partiendo de este extracto celular se logró purificar una lap a homogeneidad empleando cuatro etapas en la purificación: cromatografías convencionales de intercambio iónico (deae celulosa) y de interacción hidrofóbica (phenyl sepharose), seguida de cromatografía en fplc de intercambio iónico (mono q) y de tamizado molecular (superose 12 hr). la lap fue purificada 520 veces y muestra una actividad específica de 195 u mg-1 de proteína siendo el rendimiento del 31%. El enzima nativo es un homodímero de 74 a 76 kda constituído por dos subunidades de 37 kda. El enzima puro libera preferentemente leu situada en el extremo nh2-terminal de diversos sustratos pero no ácido aspártico ni glutámico. Esta especificidad permite su clasificación como leucil aminopeptidasa bacteriana, apareciendo en la vigente nomenclatura de enzimas registrada como ec 3.4.11.10.
Datos académicos de la tesis doctoral «Purificacion y caracterizacion de una leucina aminopeptidasa de lactobacillus plantarum.«
- Título de la tesis: Purificacion y caracterizacion de una leucina aminopeptidasa de lactobacillus plantarum.
- Autor: Pablo Casares Proaño
- Universidad: País vasco/euskal herriko unibertsitatea
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1998
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Juan Luis Serra Ferrer
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Federico Uruburu Fernández
- Concepcion Rodriguez Fernandez (vocal)
- Josefa Liboria Segovia Parra (vocal)
- Unai Ugalde Martinez (vocal)