Tesis doctoral de Monica Pernas Ochoa
Se ha llevado a cabo la purificación y caracterización de un inhibidor de cisteín proteasas, csc, de semilla de c. sativa. Se ha aislado su clón de cdna a partir de una librería de semillas inmaduras de castaña. El inhibidor fué expresado en e. Coli y purificado del extracto bacteriano. La identidad de la cistatina recombinante y la de semilla fue confirmada por analisis maldi, electroforesis bidimensional y las secuencias amino terminales. La csc tiene una masa molecular de 11275 da y un pi de 6.9. Su consecuencia de aminoácidos incluye tres motivos conservados esenciales para la actividad inhibitoria y muestra una identidad de secuencia significativa con otras fitocistatinas. La csc recombinante inhibe papaína (ki:29nm), ficina (ki: 65 nm), quimopapaína (ki: 366nm) y catepsina b (ki: 473nm). al contrario de la mayoría de las cistatinas también se detectó actividad inhibitoria frente a tripsina (ki:3489 nm). Los patrones de expresión de csc durante el desarrollo de la semilla fueron diferentes a los de otras cistatinas. La csc es efectiva frente a extractos de distintos ácaros e insectos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Purificacion, clonacion, expresion y propiedades inhibitorias de una cistatina de castanea sativa.«
- Título de la tesis: Purificacion, clonacion, expresion y propiedades inhibitorias de una cistatina de castanea sativa.
- Autor: Monica Pernas Ochoa
- Universidad: Politécnica de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1998
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Gabriel Salcedo Durán
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Cipriano Aragoncillo Ballesteros
- Julio Salinas Muñoz (vocal)
- Pedro Castañera Dominguez (vocal)
- José Juan Sanchez Serrano (vocal)