Tesis doctoral de Ramírez Bajo M. José
El trabajo de esta tesis se centra en la caracterización genética, enzimática, estructural, enzimática y metabólica de un déficit de fosfoglicerato quinasa que cursa con anemia hemolítica. Para ello se secuenció todo el gen de la pgk-1 encontrándose una única mutación en el exón 3 (46ile – asn). al tratarse de un niño de corta edad y debido a la escasez de muestra, se procedió al clonaje de la enzima normal y mutada. Una vez conocida la mutación, se hizo el modelaje estructural, concluyéndose que sólo se veía alterada la estabilidad del enzima. La caracterización enzimática se centró en estudios de valores de km, ph óptimos, efectos inhibitorios, termoestabilidad y movilidad electroforética de hemolizados y clones, concluyéndose que todas estas características sólo se observaba una disminución de la estabilidad del enzima mutado, siendo el resto normal. A nivel de alteración metabólica se determinaron los niveles de los intermediarios metabólicos de la glucólisis y delos nucleótidos adenílicos, observándose sólo un aumento de los niveles de 2,3 bpg y una disminución de los de atp. Como conclusión general de la tesis, la deficiencia enzimática es debida a una única mutación (46ile-asn) que disminuye la estabilidad del enzima bajando los niveles de actividad y causando un aumento de 2,3 bpg y una disminución de atp eritrocitaria, que darían lugar a la hemólisis causante de la anemia.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización genética, estructural, económica y metabólica de un déficit de fosfoglicerato quinasa que cursa con anemia hemolítica«
- Título de la tesis: Caracterización genética, estructural, económica y metabólica de un déficit de fosfoglicerato quinasa que cursa con anemia hemolítica
- Autor: Ramírez Bajo M. José
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 30/10/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- José Carreras Barnés
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Cortes tejedor
- francesc González sastre (vocal)
- dolors Colomer (vocal)
- (vocal)