Tesis doctoral de Cintia Muñoz Quiles
Durante los últimos años el trasplante de glía envolvente olfatoria (oeg) se ha convertido en una de las estrategias experimentales más prometedoras para reparar los diferentes tipos de lesión de la médula espinal de mamíferos (imaizumi et al., 1998; li et al., 2003; nash et al., 2002; plant et al., 2003; ramon-cueto and nieto-sampedro, 1994; ramon-cueto et al., 1998; ramon-cueto et al., 2000; ruitenberg et al., 2005; verdu et al., 2003). Estas células promueven la recuperación funcional y la regeneración axonal en ratas adultas con lesiones medulares traumáticas de diferente gravedad. en la primera parte de este trabajo nos hemos centrado en el estudio, in vivo, del efecto de la oeg de rata adulta como terapia reparadora en la fase subaguda (un mes post-lesión) y crónica (cuatro meses) de la lesión medular. Puesto que todavía no se ha encontrado ninguna estrategia reparadora que permita mejorar la situación de los pacientes con lesión de la médula espinal, existen muchos pacientes que se encuentran en la fase crónica de la lesión y que necesitan una terapia promotora de la regeneración en su estado. Además, si esta terapia llegara a su fase clínica, la posibilidad de encontrar un tratamiento eficaz frente a las lesiones crónicas de la médula espinal, permitiría a los hospitales el poder realizar los trasplantes pasado un periodo y en el momento en que el paciente ya estuviera estabilizado. Por estos motivos es necesario estudiar si las diferentes terapias que han sido aplicadas con éxito en la fase aguda de la lesión en experimentos animales, conservan su efectividad cuando son aplicadas en la fase crónica de la lesión. Una de estas estrategias reparadoras de las lesiones de la médula espinal, que se sabe es promotora de la regeneración axonal y recuperación funcional de ratas parapléjicas, es el trasplante de oeg. En este trabajo hemos probado la eficacia terapéutica del trasplante de estas células una vez que ha pasado tiempo tras la lesión. hemos demostrado que la oeg promueve tanto la recuperación funcional de ratas parapléjicas con sección completa en sus médulas espinales, como la regeneración axonal de sus neuronas supraespinales, alcanzando el muñón caudal a la lesión, cuando el trasplante se retrasa hasta cuatro meses post-lesión. La recuperación funcional e histológica fue significativamente superior que en los animales no trasplantados, indicando que al menos durante 4 meses después de la lesión, las neuronas lesionadas conservan la capacidad de responder a estrategias promotoras del crecimiento. Además hemos diseñado un método de trazado que nos permite contabilizar todas aquellas neuronas supraespinales que fueron capaces de regenerar su axón a través de la zona de la lesión y de penetrar en el muñón caudal. Mediante esta técnica de trazado hemos detectado regeneración en neuronas del núcleo rojo, rafe, vestibular, de la formación reticular y del locus coeruleus, todos ellos involucrados en la iniciación y el mantenimiento de la postura durante la locomoción voluntaria. El hecho de poder retrasar los trasplantes de oeg hasta 4 meses sin observar pérdidas en su capacidad promotora de la regeneración, garantiza la disponibilidad del tiempo requerido para la extracción del bulbo olfatorio, la puesta en cultivo, propagación y preparación de la oeg para poder aplicar esta terapia de forma autóloga, permitiendo a su vez la estabilización de los pacientes en el caso de su traslado a la clínica. además hemos diseñado un sistema de estabilización de la columna vertebral mediante puentes fabricados con cemento dental. Estos puentes resultaron ser inocuos, disminuyeron el porcentaje de animales que desarrolló escoliosis y promovieron cierto grado de recuperación funcional espontánea en animales que no recibieron trasplante de oeg. Sin embargo, esta recuperación siempre fue significativamente inferior a la que se observó en animales que recibieron trasplantes de oeg. finalmente, otro de los objetivos fundamentales de este trabajo ha sido el estudio, in vitro, de la oeg de primate no-humano, por su mayor proximidad filogenética a los humanos, y su comparación con la de roedor, cuya capacidad promotora de la regeneración ya ha sido demostrada. En este trabajo se han presentado evidencias que muestran por primera vez, que la oeg se puede obtener a partir de bulbos olfatorios de primates adultos mediante bulbectomías unilaterales, y que un solo bulbo olfatorio proporciona suficiente oeg fenotípicamente adecuada para una terapia celular segura, mediante trasplantes autólogos o heterólogos en primates.
Datos académicos de la tesis doctoral «Trasplante de glíaenvolvente olfatoria para reparar lesiones crónicas de la médula espinal de ratas adultas: de roedores a primates«
- Título de la tesis: Trasplante de glíaenvolvente olfatoria para reparar lesiones crónicas de la médula espinal de ratas adultas: de roedores a primates
- Autor: Cintia Muñoz Quiles
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 03/05/2007
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Almudena Ramon Cueto
- Tribunal
- Presidente del tribunal: María isabel Fariñas gomez
- jordi Perez tur (vocal)
- pedro Fenollosa vazquez (vocal)
- paola Bovolenta nicolao (vocal)