Tesis doctoral de Sabry Mousa Soliman Youssef Mehana
La fresa cultivada, fragaria x ananassa duch., Es una especie de alto interés agronómico, siendo españa la segunda productora a nivel mundial. La mejora genética de este cultivo se ve dificultada por el alto grado de heterozigosis que presenta esta especie. En los últimos años se han logrado mejorar determinados caracteres como la resistencia a hongos y la calidad del fruto mediante técnicas biotecnológicas. Los objetivos de esta tesis fueron, por un lado, el determinar la capacidad de regeneración in vitro de diferentes cultivares de interés en egipto, como paso previo a la aplicación de protocolos de transformación genética en los mismos, y por otro lado, el evaluar el efecto de la transformación con genes de pectato liasa, celulasa e invertasa sobre la calidad del fruto maduro. En cuanto al primer objetivo, se testó la eficacia de la regeneración de brotes adventicios de diferentes tipos de explantos de los cultivares chandler, rosa linda, diamante, gaviota y sweet charlie. En todos los casos, salvo el cv. Diamante, el disco de hoja dio los porcentajes más altos de regeneración, entre el 60-75%. En el caso de diamante, la mayor tasa de regeneración se obtuvo utilizando hojas completas como explanto. En los cultivares sweet charlie, rosa linda y gaviota se evaluó la incidencia de variación somaclonal en los brotes regenerados, observándose una baja tasa de alteraciones morfológicas, si bien las líneas regeneradas de sweet charlie y rosa linda mostraron un retraso notable en la floración y una ligera disminución del peso medio del fruto. En cuanto a la transformación genética, se introdujeron distintas construcciones en el cv. Chandler, evaluándose la calidad del fruto en las plantas transgénicas durante dos años de cultivo. La introducción de un gen de pectato liasa en sentido provocó una cosupresión del gen en frutos maduros, siendo los frutos con bajos niveles de pectato liasa más firmes que los testigos. También se obtuvieron varias líneas transgénicas conteniendo una secuencia en antisentido de genes de celulasa y de pectato liasa. En los frutos, se observó un alto grado de silenciamiento de ambos genes y todas las líneas mostraron una mayor firmeza de frutos que los testigos. Sin embargo, el incremento en firmeza fue similar al obtenido en las plantas con el gen de pectato liasa silenciado, lo que indicaría que no existe un efecto sinérgico entre la expresión de ambos genes y la firmeza de fruto. Finalmente, se obtuvieron plantas transgénicas expresando una secuencia en antisentido de un gen de invertasa vacuolar. En todas las líneas transgénicas se observó una notable reducción del peso del fruto. Se evaluó el contenido de sacarosa y hexosas, glucosa y fructosa, en algunas líneas, siendo mayores los niveles de sacarosa y menores los de hexosas en los frutos transgénicos. Los potenciales hídrico y osmótico de los frutos transgénicos fueron mayores que los de los testigos. Por tanto, la acumulación de sacarosa en los frutos anti-invertasa aumenta el potencial hídrico del fruto y reduce la capacidad del mismo de captar agua, siendo esto último la causa del menor tamaño de los frutos transgénicos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Mejora biotecnologica de fresa (fragaria x ananassa duch.): i. efecto del genotipo en la capacidad de regeneracion. ii: transformacion con genes que modifican las caracteristicas del fruto«
- Título de la tesis: Mejora biotecnologica de fresa (fragaria x ananassa duch.): i. efecto del genotipo en la capacidad de regeneracion. ii: transformacion con genes que modifican las caracteristicas del fruto
- Autor: Sabry Mousa Soliman Youssef Mehana
- Universidad: Málaga
- Fecha de lectura de la tesis: 27/09/2007
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Fernando Pliego Alfaro
- Tribunal
- Presidente del tribunal: victoriano Valpuesta fernandez
- Juan Blanco muñoz (vocal)
- María m Sahrawy barragan (vocal)
- iraida Amaya saavedra (vocal)