Tesis doctoral de Harold Oliva Mayegas
Apobec3g (a3g), un miembro de la familia de las citidín deaminasas, que mutan el dna y/o editan el rna, actúa como una molécula de la inmunidad innata que restringe la infección por el vih-1 tras su entrada en las células diana. La proteína vif del vih contrarresta ese efecto protector de a3g. El presente estudio, que se emprendió poco después de que se descubriera a3g y su función antivírica, se enmarcó en la línea de investigación cuya hipótesis de trabajo general establece que la mayor o menor efectividad de moléculas del sistema inmunitario innato o adaptativo determinan la diferente susceptibilidad interindividual para la infección por vih-1 y su progresión hacia sida y que conocer tales moléculas y su forma de actuar, puede conducir a descubrir nuevas dianas terapéuticas contra el vih-1. Dicho estudio implicaba analizar la expresión de a3g tanto a nivel de rna como de proteína en las principales células dianas del vih-1, a saber, los linfocitos t cd4 en condiciones quiescentes y de activación-proliferación, y las células dendríticas (dc) inmaduras (imdc) y maduras (mdc) de individuos normales no infectados y de cohortes de individuos infectados por el vih en diferentes estadios de la infección. Cuando iniciamos el trabajo, no había ninguna información sobre tales datos, y no se podía analizar la expresión de a3g como proteína a nivel de célula individual mediante citofluorimetría y/o microscopía de inmunofluorescencia confocal, ni tampoco aislar la proteína endógena, ya que no existía ningún reactivo apropiado (anticuerpo monoclonal murino, moab) que lo permitiera. Por tanto, nuestro primer objetivo concreto fue obtener moabs contra a3g capaces de realizar esos análisis. Uno de los moabs obtenidos, apo-7, constituye verdaderamente una herramienta muy útil y única hasta el momento, ya que cumple con todos esos requisitos, y nos ha permitido estudiar los patrones de expresión y distribución subcelular de esta proteína, así como estudiar la a3g endógena purificada por inmunoprecipitación. hasta ahora, los estudios sobre a3g se han centrado en el mecanismo de interacción entre a3g y vih y se han realizado con células transfectadas. En dichos estudios, prácticamente nadie ha utilizado la proteína endógena, lo que tal vez haya contribuido a los resultados contradictorios publicados sobre el mecanismo de acción de a3g. la activación de linfocitos genera un gran aumento de expresión de a3g, que además implica una translocación desde el citoplasma al núcleo celular, así como la agregación de a3g con otras proteínas intracelulares, lo que concuerda con la formación de complejos de alto peso molecular (hmm), en los cuales a3g pierde su capacidad de restringir la infección. La maduración de dcs genera un aumento de expresión de a3g, sin una translocación neta al núcleo, y sin que se produzca la agregación de a3g, lo cual es compatible con su conformación de bajo peso molecular (lmm). Esto sería otro factor que explicaría la menor vulnerabilidad a la infección productiva por el vih en las mdcs, con respecto a las imdcs. finalmente, y de acuerdo con nuestra hipótesis de trabajo, el estudio de los patrones de expresión de a3g por crtometría de flujo con el moab apo-7 en linfocitos t cd4 y cd8 de distintas cohortes de pacientes, sugiere que un bajo nivel de expresión de a3g se asocia con resistencia a la infección (pacientes expuestos no infectados), probablemente debido a que a3g se encuentra en su forma de bajo peso molecular en estos individuos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Apobec3g y resistencia a la infección por el vih y su progresión hacia sida«
- Título de la tesis: Apobec3g y resistencia a la infección por el vih y su progresión hacia sida
- Autor: Harold Oliva Mayegas
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 04/06/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Josep María Gatell Artigas
- Tribunal
- Presidente del tribunal: tomas Pumarola suñe
- José Alcami pertejo (vocal)
- margarita Bofill soliguer (vocal)
- dolores Jaraquemada pérez de guzmán (vocal)