Tesis doctoral de Miriam Jose Alvarez Martinez
Desarrollo de técnicas de diagnóstico molecular de pneymocystis jirovecii, y conocimiento de la preValencia de la resistencia a sulfamidas. Objetivos. 1. Desarrollar técnicas de diagnóstico molecular de o. Jirovecii y de tipado del gen de la dihidropteroato sintetasa (dhps) de p. Jirovecii. 2. Determinar la preValencia de p. Jirovecii con mutaciones en el gen de la dhps, en pacientes vih-positivos con neumonía por pneumocystis (pcp) en españa, en el periodo de la terapia antirretroviral combinada (c-art). 2.1. Estudiar la asociación entre las mutaciones y la exposición previa a sulfamidas y sulfonas. 2.2. Estudiar los factores pronóstico de mortalidad en la pcp, y el impacto clínico de presencia de mutaciones en la dhps. 3. Determinar la preValencia de p- jiroveii con mutaciones en el gen de la dhps, en pacientes vih- positivos con neumonía por pneumocystis (pcp) en hospital clinic de barcelona, en el período previo a la terapia antirretroviral combinada (pre c-art), 1989-1995, y compararla con la del periodo c-art, 2001-2004, en el mismo centro. 4. Conocer la epidemiología de la pcp, y la preValencia de las mutaciones en el gen de la dhps de p. Jiroveii, en áfrica (sudáfrica y malawi) y sudamérica (brasil). Conclusiones: 1. Se desarrollaron dos técnicas de pcr, una nested-pcr y una pcr cuantitativa a tiempo real, para el diagnóstico de pneumocystis jirovecii, mediante la detección del gen de la dhps. Dichas técnicas presentaron una sensibilidad que osciló entre el 62.5% y el 100% dependiendo del tipo de muestra clínica, y su método de conservación. 2. En un subgrupo de 71 muestras positivas para p. Jirovecii, confirmadas microscópicamente, y 70 muestras negativas, los valores de sensibilidad y especificidad fueron de 94% y 81%, para la nested-pcr, y de 94% y 96%, para la rt-pcr.3. La t-pcr cuantitativa, con un límite de detección de 1 copia de dhps / ¿l de muestra, presentó una especificidad significativamente mejor, que la nested-pcr. Por lo tanto, podría considerarse la técnica recomendada para el diagnóstico de p. Jirovecii. 4. La preValencia de mutaciones en el gen de la dhps de p.Jirovecii en españa, en la era c-art, fue del 3.7%, siendo la preValencia más baja descrita hasta el momento en eua y europa. 5. Aproximadamente el 50% de los pacientes de nuestra serie de la era c-art presentó una pcp, como debut de la infección por vih. Por lo tanto, no habían estado previamente expuestos a profilaxis con sulfamidas. Este hecho explicaría la baja preValencia de mutaciones en el periodo c-art en nuestro país. 6. La mortalidad global de la serie de pacientes en la era c-art fue de 15%, elevándose a 80% en los pacientes que requirieron ventilación mecánica. 7. Ninguno de los pacientes que presentó mutaciones en el gen de dhps requirió ingreso en uci, ni murió. Por lo tanto, podemos concluir que su presencia no se asocia a un peor pronóstico en la pcp. 8. Las mutaciones en el gen de dhps sólo confieren un bajo nivel de resistencia a las dosis de sulfamidas administradas como profilaxis, pero a mayores dosis de sulfamidas, administradas con fines terapéuticos, el tratamiento con tmp-smx fue efectivo en la mayoría de los casos. 9. Presentar una pao2<60mmhg al ingreso se identificó como un factor de riesgo de ingreso en uci, mientras que haber tomado c-art previamente, se mostró como un factor protector. 10. Presentar una pao2<60mmhg al ingreso, o la necesidad de ingreso en uci durante la 1º semana de hospitalización, se asociaron a una mayor mortalidad. La severidad de la insuficiencia respiratoria al ingreso determinó el pronóstico de la pcp. 11. Las mutaciones en el gen de la dhps fueron más frecuentes en el periodo pre-cart (1989-1995), que en el periodo c-art (2001-2004), siendo del 33% vs 5.5%, respectivamente. La exposición previa a las sulfamidas en los pacientes en el periodo pre-cart fue del 51%frente al 20% en el período c-art, lo que explicaría la mayor preValencia de mutaciones. Sin embargo, su presencia tampoco empeoró al pronóstico de la pcp. 12. Las mutaciones en dhps de p. Jirovecii fueron infrecuentes en niños sudafricanos infectados por vih (preValencia de 13.3%), siendo probablemente debido a una transmisión madre-hijo de cepas mutantes, más que a una sobre-exposición a sulfamidas. Aunque la mortalidad por pcp en adultos infectados por vih en malawi fue de 1.0/100 personas/a, siendo menor que la incidencia de la tuberculosis pulmonar y de la neumonía bacteriana. 14. No se detectaron mutaciones en la serie de 70 pacientes infectados con vih y pcp en brasil, por una menor exposición a sulfamidas.
Datos académicos de la tesis doctoral «PreValencia de pneumocystis jirovecii con mutciones asociadas a resistencia a las suffamidas en pacientes con infeccion por vih-1. estudio de los factores de riesgo y valor pronostico en la neumonia por pneumocystis jirovecii (pcp)«
- Título de la tesis: PreValencia de pneumocystis jirovecii con mutciones asociadas a resistencia a las suffamidas en pacientes con infeccion por vih-1. estudio de los factores de riesgo y valor pronostico en la neumonia por pneumocystis jirovecii (pcp)
- Autor: Miriam Jose Alvarez Martinez
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 03/09/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Mª Teresa Jiménez De Anta
- Tribunal
- Presidente del tribunal: tomas Pumarola suñe
- antoni Trilla garcia (vocal)
- Alberto Pahissa berga (vocal)
- Santiago Moreno guillen (vocal)