Tesis doctoral de García Murria María Jesús
La ribulosa 1 ,5-bisfosfato carboxilasa oxigenasa (rubisco) cataliza el primer paso en la fijación fotosintética del c02 a través del ciclo de calvin. La estructura del holoenzima activo en organismos eucariotas es un hexadecámetro, compuesto por 8 subunidades grandes (de 51-58kda) y 8 subunidades pequeñas (de 12-18kda). En condiciones de senescencia natural o inducida por estrés la rubisco sufre una degradación rápida y selectiva. una de las respuestas más generalizadas ante diferentes tipos de estres en distintos organismos es la oxidación de grupos tioles de la rubisco, que se ha relacionado in vitro e in vivo con la inactivación y susceptibilización proteolítica del enzima. Los residuos de cisteinas filogenéticamente conservados de la rubisco son candidatos potenciales a mediar esta regulación redox. con estos antecedentes, el objetivo general del presente trabajo ha sido evaluar la implicación de los residuos cys172y cys192 (altamente conservados en eucariotas y cianobacterias) en la actividad, modulación redox, y en la organización estructural del holoenzima. Para ello se han abordado los siguientes aspectos: i. Obtención y caracterización de las rubiscos mutantes c172s, c192s y c172s/c192s: las funciones de los residuos cys 172 y cys 192 se han investigado estudiando el fenotipo de mutantes en los que dichos residuos se han sustituido por serina mediante mutagénesis dirigida del gen rbcl en el alga unicelular chlamydomonas reinhardtii.El enzima c1728 posee un factor de especificidad mayor que el silvestre, con unas constantes aparentes de michaelis para el c02 y 02 aumentadas.La rubisco c1928 presenta una especial sensibilidad a la inactivación por agentes modificadores de grupossulfhidrilo. Ello parece responder al caracter crítico de la modificación de la cys172 en la actividad enzimática y alefecto protector que sobre este residuo ejerce la cys192.El estudio del ensayo de la sensibilidad térmica,
Datos académicos de la tesis doctoral ««regulación redox de la rubisco: contribución estructural y funcional del par de residuos conservados cys172 y cys192»«
- Título de la tesis: «regulación redox de la rubisco: contribución estructural y funcional del par de residuos conservados cys172 y cys192»
- Autor: García Murria María Jesús
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 06/04/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Joaquin Moreno Mariño
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan Carbonell gisbert
- Luis alfonso Del rio legazpi (vocal)
- Francisco Javier Florencio bellido (vocal)
- vicente Rubio zamora (vocal)