Metabolismo del acetato en phycomyces blakesleeanus. purificación y caracterización de dos acetil-coa sintetasas

Tesis doctoral de Cima Martin Sergio De

Phycomyces blakesleeanus es un hongo filamentoso capaz de crecer en acetato, para lo cual necesita la enzima acetil-coa sintetasa (acs1), codificada por el gen faca, que es inducido por acetato y reprimido por glucosa. Hemos detectado en situaciones de estrés por ausencia de fuente de carbono la existencia de una segunda acetil-coa sintetasa (acs2), que no es codificada por el gen faca y no contribuye al crecimiento del organismo en acetato. Ambas acs han sido purificadas y caracterizadas, siendo sus propiedades cinéticas similares entre ellas. Las dos enzimas pueden activar propionato además de acetato, muestran una cinética de saturación hiperbólica con respecto a acetato, propionato, coenzima a y atp, y tienen un ph óptimo en torno a 8,0. Ninguno de los metabolitos intermediarios estudiados tuvo algún efecto inhíbidor o activador sobre ninguna de las dos enzimas. Por otro lado, la inhibición por nem y anhídrido succínico sugiere la participación de al menos un residuo de cisteína y un residuo de lisina en el centro activo y/o en el mantenimiento de la estructura nativa de ambas enzimas. La diferencia más notable encontrada entre ambas enzimas es su diferente temperatura óptima: 30ºc para acs1 y 50ºc para acs2, temperatura esta última muy superior a la temperatura de crecimiento del hongo. También la estabilidad frente a temperatura, ph, urea y digestión por tripsina es mayor en acs2 que en acs1, lo que apoya la teoría de que acs2 tiene una mayor rigidez conformacional y pueda ser considerada una proteína de estrés.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Metabolismo del acetato en phycomyces blakesleeanus. purificación y caracterización de dos acetil-coa sintetasas«

  • Título de la tesis:  Metabolismo del acetato en phycomyces blakesleeanus. purificación y caracterización de dos acetil-coa sintetasas
  • Autor:  Cima Martin Sergio De
  • Universidad:  León
  • Fecha de lectura de la tesis:  24/05/2006

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Mª Dolores Arriaga Giner
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: angel Reglero chillon
    • Juan José Aragón reyes (vocal)
    • Fernando Moreno sanz (vocal)
    • mercedes Renobales scheifler (vocal)

 

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