Tesis doctoral de Natalia De La Fuente De Los Llanos
En un trabajo anterior llevado a cabo en el laboratorio, se aislaron mutaciones en seis genes (apa2, apa3, apa4, apa5, apa6 y apa7) que afectaban a la regulación de los niveles de la h+-atpasa de la membrana plasmática de saccharomyces cerevisiae. el objetivo del presente trabajo fue la caracterización bioquímica y molecular de estos genes. Los genes apa3, 4, 5 y 6, no pudieron ser clonados debido a la presencia en la genoteca de dos supresores no específicos de alelo que se correspondían con mat1 y srk1. Los genes apa2 y apa7 pudieron ser identificados y resultaron ser rsp5 y yor137c, respectivamente. yor137c codifica una proteína de membrana de función desconocida. Su deleción no afecta a la cantidad de h+-atpasa presente en la membrana plasmática pero afecta al incremento de la vmax cuando activamos con glucosa. rsp5 codifica una ubicuitina ligasa implicada en la ruta de degradación proteolítica ubicuitina-proteasoma. Mutaciones en dicho gen afectan al descenso que se produce en la km en presencia de glucosa. Su estudio nos llevó a postular la existencia de una hipotética proteína negativa del proceso de activación de la h+-atpasa. En el intento de determinar la posible naturaleza de dicha proteína, mediante el empleo de diversas estrategias, encontramos que la ruta wsc2-rho1-pkc1-bck1-mkk1/2-mpk1, el factor de transcripción hal7/yap6 y dos proteínas de función desconocida, codificadas por los genes yjr134c e ymr102c, debían estar implicados en la regulación de la expresión de genes que intervienen en la activación de la atpasa.
Datos académicos de la tesis doctoral «Aislamiento y caracterizacion de genes implicados en la regulacion de la h+-atpasa de la membrana plasmatica de saccharomyces cerevisiae«
- Título de la tesis: Aislamiento y caracterizacion de genes implicados en la regulacion de la h+-atpasa de la membrana plasmatica de saccharomyces cerevisiae
- Autor: Natalia De La Fuente De Los Llanos
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 27/01/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco Portillo Perez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Sillero repullo
- iñigo Fernandez de carrinda (vocal)
- ramón Serrano salom (vocal)
- alonso Rodriguez navarro (vocal)