Tesis doctoral de Ingrid Hernandez Lantigua
En la tesis presentada se ha clonado por complementación funcional el gen cps1+,codificador de la carboxipeptidasa s de la levadura de fisión schizosaccharomyces pombe, secuenciandose toda la pauta abierta de lectura y las regiones 5¿y 3¿flanquantes. La proteína codificada pertenece a la familia m20 de metalocarboxipeptidasas, habiendose localizado residuos implicados en la unión del metal y en la actividad catalítica del enzima. mediante extensión del cebador se identificó el sitio de inicio de la transcripción para el gen cps1+, localizado en la posición -194, a partir del cual sugerimos que la secuencia que actúa como caja tata en el promotor se sitúa en la posición-367. se ha estudiado la expresión del gen mediante análisis northern realizado en diferentes condiciones nutricionales y ambientales. Se ha comprobado que los niveles del arn mensajero correspondiente se elevan significativamente en presencia de fuentes de nitrógeno. Este compportamiento es típico de genes sometidos a un sistema genérico de control transcripcional denominado represión catabólica por nitrógeno. se han identificado y comprobado la funcionalidad, mediante ensayos de retardo en la movilidad electroforética, tres partes de secuencias consenso de unión a factores de transcripción pertenecientes a la familia gata. se han identificado varios de estos factores trans implicados en la regulación de la expresión del gen y se han purificado algunos de ellos mediante cromatografía de afinidad, utilizando extractos proteicos obtenidos de células en condiciones desrepresoras.
Datos académicos de la tesis doctoral ««analisis molecular de la carboxipeptidasa s de la levadura de fisión schizosaccharomyces pombe»«
- Título de la tesis: «analisis molecular de la carboxipeptidasa s de la levadura de fisión schizosaccharomyces pombe»
- Autor: Ingrid Hernandez Lantigua
- Universidad: Oviedo
- Fecha de lectura de la tesis: 03/04/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Suarez Rendueles M. Paz
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Carlos Gancedo rodríguez
- María no Gacto fernández (vocal)
- Fernando Moreno sanz (vocal)
- rosario Cueva noval (vocal)