Tesis doctoral de María Paloma Diez Ferrero
Null en la tesis se desarrolla un protocolo de pcr-rflp para tipado de neisseria meningitidis basado en la amplificación y posterior restricción del gen pora. Las proteínas codificadas por el mismo (pora) permiten clasificar a este microorganismo en disti ntos serosubtipos y a su vez, permiten realizar la caracterización antigénica del mismo, necesaria para el control de brotes epidémicos y desarrollo de futuras estrategias de control. para el desarrollo del protocolo se analizaron un total de 388 ce pas correspondientes a los diferentes serosubtipos. Para validar los resultados obtenidos por nuestra técnica se procedió a la secuenciación del gen pora en un alto porcentaje de las cepas. La alta variabilidad de este gen, ha obligado a desarrollar un algoritmo consistente en una digestión secuencial con varias enzimas de restricción que van desembocando en la identificación de los diferentes subtipos. El desarrollo de este método lleva asociado la utilización de un algoritmo que permite utiliz ar una nomenclatura compatible con las utilizadas clásicamente. para analizar el nivel de tipabilidad de este protocolo se analizaron 95 cepas no serosubtipables (nsts) obtenidas mediante anticuerpos monoclonales (acms), obteniéndose con nuestra técn ica, un porcentaje de cepas con subtipo no definido menor que el porcentaje generado de cepas nsts por acms. Esta mejora permite un conocimiento más amplio de la distribución de los distintos subtipos en una determinada región geográfica. se trata de un método alternativo a las metodologías utilizadas clásicamente en el subtipado, como son los acms y el genosubtipado, con problemas de accesibilidad y alto coste económico, respectivamente. Por tanto, este tipo de estrategia podría permitir que la boratorios con recursos reducidos puedan realizar la caracterización antigénica de este microorganismo.
Datos académicos de la tesis doctoral «Nueva estrategia de tipado en neisseria meningitidis: polimorfismo y fragmentos de restricción del gen por-a«
- Título de la tesis: Nueva estrategia de tipado en neisseria meningitidis: polimorfismo y fragmentos de restricción del gen por-a
- Autor: María Paloma Diez Ferrero
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 12/12/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Julio A. Vázquez Moreno
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José Francisco (secretario) Fernandez-garayzabal fernandez
- (vocal)
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