Tesis doctoral de Mª Luisa Pérez Rodríguez
La artritis reumatoide (ar) es una enfermedad inflamatoria autoinmune bastante frecuente. Debido a los procesos de autoinmunidad, el suero de pacientes con ar contiene gran cantidad de anticuerpos; de ellos, los anticuerpos frente a péptidos citrulinados son considerados marcadores muy específicos de la ar. Se ha demostrado que la diana de los anticuerpos de ar es la proteína fibrina en su forma deiminada (modificada postraduccionalmente en la que algunos residuos de arginina se transforman en citrulina). en esta tesis doctoral se han diseñado y sintetizado, utilizando la metodología de síntesis en fase sólida, péptidos citrulinados derivados de las cadenas a- y p- de la proteína fibrina para utilizarlos como sustrato antigénico en un inmunoensayo tipo elisa para el diagnóstico de la ar. mediante predicción teórica, el escaneado por epitope mapping, y teniendo en cuenta el número de argininas de las secuencias (para intercambiar por citrulinas) se seleccionaron regiones potencialmente antigénicas y de ellas se sintetizaron los péptidos con mayor número de citrulinas en fase sólida. Para comprobar la importancia de la presentación del aminoácido citrulina dentro de una secuencia peptídica, se han sintetizado los péptidos lineales totalmente citrulinados asi como todas las posibles combinaciones arginina/citrulina de cada secuencia. La capacidad antigénica de las construcciones sintéticas se ha evaluado utilizando la técnica del enzimoinmunoensayo (elisa). con el objeto de desarrollar una nueva prueba de tipo elisa para la detección de autoanticuerpos específicos de ar, que mejore los valores de sensibilidad y especificidad de los kits comerciales actuales se han utilizando estos péptidos como sustrato antigénico. Además, se han estudiado los efectos de los diferentes formatos de presentación de dichos péptidos. Se han diseñado y sintetizado tanto péptidos cíclicos, en los que los epítopos sufren restricción de movilidad, como quiméricos, que contienen más de un epítopo (lineales y cíclicos). Los resultados obtenidos mediante elisa muestran, por un lado, que la restricción de movilidad mediante la incorporación de un ciclo en la molécula permite incrementar la sensibilidad mostrada por la molécula precursora lineal; por otro lado, la combinación de secuencias mejora el reconocimiento de los péptidos por separado. finalmente, para comprobar una posible asociación entre la presencia de anticuerpos anti-péptido citrulinado y la presencia del epítopo reumatoide (er) se han sintetizando péptidos procedentes de la proteína (3-fibrina. Mediante diferentes clasificaciones de los sueros según la información genética de sus hla, se ha podido comprobar que existe una asociación significativa con la presencia de los alelos de er, concretamente relacionados con los alelos que codifican para la secuencia qrraa.
Datos académicos de la tesis doctoral «Péptidos sintéticos en el diagnóstico de la artritis reumatoide«
- Título de la tesis: Péptidos sintéticos en el diagnóstico de la artritis reumatoide
- Autor: Mª Luisa Pérez Rodríguez
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 17/12/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Isabel Haro
- Tribunal
- Presidente del tribunal: amadeu Llebaria soldevilla
- María José Rodrigo anoro (vocal)
- francesc Rabanal (vocal)
- Marta Larrosa padro (vocal)