Tesis doctoral de Juan Jesús Molina Rueda
En esta tesis doctoral se han llevado a cabo los siguientes bloques experimentales: (1) caracterización molecular de la isocitrato deshidrogenasa citosólica (idh) de pinus pinaster (pino), así como estudios de expresión e inmunolocalización da esta enzima en plántulas y embriones de esta especie (2) generación de líneas transgénicas del híbrido populas tremula x p. Alba (chopo) que sobreexpresan la idh de p. Pinaster, así como una amplia caracterización molecular y fenotípica de dichas líneas y de plantas controles (no transformadas). (3) caracterización molecular de la glutamato descarboxilasa (gad) de p. Pinaster, así como estudios de expresión en plántulas, en hipocótilos durante el desarrollo plantillar y en tallos como respuesta a la generación de madera de compresión en esta especie. (4) localización del ácido gamma-aminobutírico (gaba) en plántulas de p. Pinaster (5) y finalmente, estudios de expresión de genes que codifican gads en plantas del híbrido p. Tremula x p. Alba, y frente al estimulo de generación de madera de tensión, estudios de correlación entre los patrones de expresión de estos genes con oíros de interés en la diferenciación vascular, así como la localización de gaba en tallos de este híbrido, la discusión de los resultados experimentales citados han llevado a enunciar las siguientes conclusiones (i) el análisis molecular y filogenético de la idh citosólica y su expresión en diferentes tipos celulares en el embrión y en plántulas de pino, sugiere que la enzima podría estar implicada en diferentes procesos fisiológicos, sin embargo, no hay evidencias de diversificación génica durante la evolución de las plantas. En órganos no fotosintéticos. La expresión de idh está asociada a los haces vasculares, lo que sugiere un posible papel en el desarrollo del sistema vascular, (u) se ha analizado la función de la idh-nadp+ citosólica mediante la sobreexpresión de un gen de pino en populus la expresión del transgén afecta al desarrollo de la planta, presentando las hojas jóvenes y el ápice del tallo un mayor desarrollo del sistema vascular las alteraciones observadas en los niveles de aminoácidos pueden estar asociadas al mayor desarrollo vascular observado en las líneas transgénicas (iii) la alta conservación de las secuencias gad en pino y chopo junto con las disponibles para herbáceas, y la presencia de un dominio de unión a calmodulina sugieren que la regulación de la actividad gad por calcio/calmodulina apareció de forma temprana en la evolución de las plantas vasculares (iv) al igual que en herbáceas, la gad está codificada por diferentes genes en pino y en chopo. Los dalos analizados de estructura génica y expresión no han permitido establecer claramente la existencia de ortólogos entre ellos, posiblemente debido a las duplicaciones genómicas y especializaciones posteriores de los genes durante la diversificación de los grupos, (v) la expresión a nivel de mrna de la gad se asocia de forma genérica a las partes jóvenes de la planta en la raíz y en el tallo, lo que sugiere un papel de esta enzima en la diferenciación de los mismos (vi) en las radículas de las plántulas de pino, la expresión de gad y localización del gaba sugieren una función de ambos en la diferenciación vascular, posiblemente asociada a la actividad del meristemo del órgano en hipocótilos de pino y en el tallo de plántulas de chopo, la expresión de la gad está asociada al inicio del crecimiento secundario y a la diferenciación del xilema durante la producción de la madera de reacción en ambas especies, (vii) el gaba se localiza en pino y en chopo en la región cambial, y en las células del parénquima radial, sugiriendo un papel como señal asociado a la diferenciación del xilema y en la comunicación entre diferentes tejidos de la planta. La presencia de gaba en las células de los conductos resiníferos indica también un papel de este metabolito en la protección frente al ataque de patógenos, (viii) los diferentes perfiles de expresión de los genes gad de chopo indican que desempeñan funciones diferentes que están aún por describir, (viv) los resultados presentes en esta memoria indican que la idh y la gad son factores relevantes en la diferenciación vascular en árboles. No obstante, se requieren estudios adicionales para determinar cómo se produce la señalización por gaba y/o glutamato en la promoción del desarrollo vascular.
Datos académicos de la tesis doctoral «Â¿están la glutamato descarboxilasa y la isocitrato deshidrogenasa citosólica implicadas en el desarrollo vascular de los árboles?.«
- Título de la tesis: ¿están la glutamato descarboxilasa y la isocitrato deshidrogenasa citosólica implicadas en el desarrollo vascular de los árboles?.
- Autor: Juan Jesús Molina Rueda
- Universidad: Málaga
- Fecha de lectura de la tesis: 27/05/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Fernando Gallardo Alba
- Tribunal
- Presidente del tribunal: isabel Allona alberich
- José joaquim Saraiva pissarra (vocal)
- Francisco Javier Corpas aguirre (vocal)
- hortensia Sixto blanco (vocal)