Tesis doctoral de Rafael Molina Monterrubio
Null streptococcus pneumoniae es una bacteria gram que posee una elevada patogenicidad para el ser humano siendo la responsable de alguno de los procesos infecciosos con mayor tasa de mortalidad en el mundo como la neumonía, meningitis, o bacteriemias. Actualmente, la inexistencia de una vacuna realmente eficaz unido a la aparición de cepas resistentes a antibióticos, hacen necesario el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas. De este modo, ha cobrado especial importancia el estudio de las pr oteínas de superficie de neumococo, como cbpf, por su posible implicación en la virulencia de la bacteria y su potencialidad como agentes antigénicos. Cbpf forma parte de la familia de proteínas de unión a colina que se caracterizan por la presencia de un dominio especializado que presenta afinidad por colina. La fosforilcolina, un componente crucial de la pared celular de neumococo, es esencial en la fisiología bacteriana y en la patogénesis humana debido a que se une a los componentes del suer o del sistema inmune y actúa como una diana de acoplamiento para la familia de las proteínas de unión a colina superficiales. mediante cristalografía de rayos x se resolvió la estructura tridimensional de la proteína de unión a colina f (cbpf), u na de las proteínas más abundantes en la pared celular de neumococo, en complejo con colina. La ausencia de homólogos estructurales de cbpf impidió abordar la determinación estructural mediante reemplazo molecular y nos condujo a la preparación de de rivados de átomo pesado necesarios para las técnicas de mir y mad/sad. La obtención de derivados de átomo pesado con las soluciones de átomo pesado convencionales no permitió la resolución estructural, fundamentalmente por la dificultad en la derivat ización de los cristales nativos, por lo que se recurrió al empleo de novedosas soluciones no comerciales de complejos de gd obteniendo cristales derivatizados de muy buena calidad proporcionándonos así información para la construcción del modelo ini cial mediante técnicas de sad. Debido a su gran poder de difracción y sus elevados valores de f¿, los átomos de los lantánidos son de gran interés para la resolución estructural de macromoléculas biológicas usando métodos de dispersión anómala (sad o mad). Dentro de los lantánidos el gadolinio tiene la ventaja de poseer una elevada señal anómala incluso usando como fuente de rayos x el ánodo rotatorio típico de los laboratorios, lo cual le convierte en átomo faseador particularmente interesante.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización estructural de la proteína modular cbpf de streptococ cus pneumoniae.aplicación de complejos de gd para la obtención de fa- ses en cristalografíamacromolecular.«
- Título de la tesis: Caracterización estructural de la proteína modular cbpf de streptococ cus pneumoniae.aplicación de complejos de gd para la obtención de fa- ses en cristalografíamacromolecular.
- Autor: Rafael Molina Monterrubio
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 11/09/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Juan Hermoso Dominguez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: pedro García gonzález
- (vocal)
- (vocal)
- (vocal)