Tesis doctoral de Jordi Félix Colmenero Arroyo
Las dos principales causas de cirrosis hepí tica en nuestro medio son la hepatitis crónica por virus c (hcc) y la hepatopatía alcohólica. La fibrosis hepática es el suceso clave en la patogénesis del desarrollo de cirrosis hepí tica en ambas entidades. El tratamiento causal, es decir la abstinencia alcohólica o la erradicación viral frena la progresión de la fibrosi hepí tica pero no se consigue en una importante proporción importante de estos enfermos. los pacientes con hepatopatía crónica alcohólica y consumo persistente de alcohol están en riesgo de desarrollar episodios de hepatis alcohólica (ha). Las formas graves de ha se asocian a una alta morbi-mortalidad y no existen tratamientos efectivos para estos pacientes. La patogenia de la ha es poco conocida y solo se dispone de información a partir modelos experimentales que no reproducen las características histológicas de la ha en humanos. La objetivo de la primera parte de la tesis fue estudiar la expresión génica intrahepática de genes clave en la fibrosis hepí tica sobre una cohorte de pacientes con ha puede ayudar a conocer mejor la patogenia y así detectar posibles dianas terapéuticas. la erradicación de la infección por virus c solo se consigue en algo más de la mitad de los pacientes con hcc. Por tanto, un gran numero de pacientes están en riesgo de presentar fibrosis hepí tica progresiva. La búsqueda de fármacos antifibrogénicos es crucial para estos pacientes. Numerosos estudios celulares y en animales muestran la utilidad de bloqueo de la angiotensina ii para frenar la fibrosis hepí tica. No obstante, se desconoce su efecto sobre la fibrogénesis hepí tica en humanos. La hipótesis del estudio es que el bloqueo del receptor tipo 1 de la angiotensina ii (at1) puede disminuir la fibrogénesis. El estudio pretende evaluar cambios en la fibrosis hepí tica de un cohorte de pacientes con hcc mediante el aní lisis de la expresión intrahepática de genes clave en la fibrogénesis hepí tica tras la administración de losartan durante 18 meses. los dos estudios que constituyen esta tesis están centrados en la cuantificación de la expresión de genes que codifican moléculas consideradas como elementos clave en la fibrosis y en la inflamación hepática de las dos enfermedades hepáticas más frecuentes. Por un lado, se ha evaluado la expresión de colágeno, reguladores de la síntesis y degradación de matriz extracelular y sustancias proinflamatorias. Además, se ha evaluado la expresión de componentes clave de dos sistemas funcionales moleculares involucrados de forma importante en la fibrosis hepática: el sra y el sistema nadph oxidasa no fagocítico. En el primer trabajo evaluó la expresión génica de 46 genes en la ha comparado con hígado controles con el objeto de identificar nuevas moléculas implicadas en su patogenia y poder identificar potenciales dianas terapeúticas. En el segundo estudio, se evaluó los efectos de un potencial tratamiento antifibrogénico para los pacientes con hcc, el bloqueo selectivo de at1 mediante losartán, en la expresión génica de 31 genes profibrogénicos, inflamatorios y del sistema nadph oxidasa no fagocítica. el primer estudio de esta tesis pone de manifiesto que en la ha existe una muy importante sobre-expresión de genes involucrados en la producción de mec, de mediadores inflamatorios y de componentes del sistema nadph oxidasa. En primer lugar, destaca que la ha es un modelo claro de sobre-expresión intensa de colágeno tipo i y iv así como de reguladores de la matriz celular con carácter fibrogénico. Dentro de los genes estudiados, destacó la importantísima sobreexpresión de gro-¿, que alcanzó niveles 30 veces superiores respecto a hígados sanos. Diferentes estudios implican a esta citoquina en los procesos de respuesta a daño hepático agudo y crónico. Cabe destacar que la sobre-regulación de esta gro-¿ es relevante en procesos de daño hepático mediado por lipolisacarido, un evento clave en la patogenia de la ha. Todo ello sugiere que gro-¿ podría jugar un papel crucial en la patogenia de la ha. Otro de los hallazgos más relevantes del presente estudio fue la expresión de novo de diversos componentes del sistema nadph oxidasa. Se puso de manifiesto sobre-expresión de dos importantes unidades del complejo nadph oxidasa, p22phox y rac-1 respecto a hígados sanos. Además, existió expresión de novo de isoformas no fagocíticas de la subunidad catalítica, nox-4 o renox, duox-1 y duox-2. Estos apoyan la hipótesis de que el sistema nadph oxidasa, con participación de isoformas no fagocíticas, podrían jugar un papel importante en la patogenia de la ha. tomado en conjunto, lo resultados de este estudio indican que gro-¿ y los componentes del complejo nadph oxidasa no fagocítico podrían participar de forma importante en la patogenia de la ha. Esta hipótesis merece estudios más detallados para averiguar el efecto del bloqueo de estas sustancais en la ha. el segundo estudio de esta tesis investiga los efectos de la inhibición prolongada y selectiva del receptor at1 mediante losartán, un antagonista del recerptor at1 (ara-ii), en la expresión génica intrahepática de pacientes con hcc y fibrosis hepática con replicación viral activa. Para ello se analizó la expresión de genes de tipo fibrogénico, mediadores inflamatorios,y componentes de sistema nadph oxidasa no fagocítico. El diseño de este estudio pretende rehuir las importantes limitaciones de un estudio de eficacia clínica de una terapia antifibrogénica. El principal hallazgo de este estudio fue que la administración de losartán se acompañó efectivamente de un descenso en la producción de colágeno i y iv, así como de mmp-2 y de ut-pa, dos importantes reguladores de la degradación de mec. Cuando se evaluó la expresión génica en el subgrupo de pacientes con mejoría histológica de la fibrosis tras la administración de losartán, se observó un descenso muy acentuado en la expresión de colágeno y mediadores fibrogénicos así como de timp-1. La administración de losartán también se acompañó de un descenso de las isoformas no fagocíticas de subunidades reguladoras del complejo nadph oxidasa, noxo-1 y noxa-1. También se observó una infraregulación de rac-1, otro componente clave en la funcionalidad del complejo napdh oxidasa en las células hepática estrelladas. El tercer hallazgo relevante de este estudio es que la administración de losartán se acompañó de una mejoría histológica del grado inflamatorio en la mitad de los pacientes. A nivel génico cabe destacar un descenso significativo en la expresión de dos de los genes estudiados, gro-¿ y mcp-1, en el subgrupo de pacientes con mejoría del grado inflamatorio. los resultados de este segunda estudio aspoyan las observaciones en modelos animales: el bloqueo del receptor at1 tiene efectos antifibrogénicos a nivel hepático. Serán necesarios estudios clínicos de eficacia para validar estos resultados. estos dos estudios de carácter traslacional ponen de manifiesto la utilidad del análisis de la expresión génica y su correlación con parámetros clínicos, analíticos, histológicos y evolutivos para el estudio de las enfermedades hepáticas.
Datos académicos de la tesis doctoral «Expresión génica hepática en pacientes con hepatopatíacrónica: identificación de dianas terapéuticas y evaluación de los efectos de un tratamiento antifibrogénico«
- Título de la tesis: Expresión génica hepática en pacientes con hepatopatíacrónica: identificación de dianas terapéuticas y evaluación de los efectos de un tratamiento antifibrogénico
- Autor: Jordi Félix Colmenero Arroyo
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 14/12/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Ramon Bataller Alberola
- Tribunal
- Presidente del tribunal: antoni Rimola castell?
- joan Claria enrich (vocal)
- (vocal)
- (vocal)