Tesis doctoral de Isaac Gállego Ossul
En nuestro laboratorio el estudio de cromosomas en presencia de una elevada concentración de iones divalentes, permitió describir por primera vez las placas de cromatina como unidad estructural básica del cromosoma metafásico compacto. En esta tesis, se han investigado extensamente estas estructuras. El estudio exhaustivo mediante tem de placas obtenidas utilizando diferentes métodos de preparación y los diferentes controles realizados, indican que las placas no son un artefacto preparativo de esta técnica. La microscopía de fuerza atómica (afm) ha permitido visualizar e investigar las propiedades mecánicas de las placas en solución acuosa. Las placas son finas (aprox. 6.5 nm; determinado mediante tem y afm) pero resistentes a la penetración por la punta de afm: su módulo de young es de aprox. 0.2 gpa y el estrés requerido para penetrar la superficie es de aprox. 0.3 gpa (mg2+ 5-20 mm). El estudio de la desnaturalización en tiempo real (mediante afm) y las medidas de fricción a nanoescala (nanontribología) han permitido estudiar las propiedades estructurales de las placas en medio acuoso a temperatura ambiente. Los resultados indican que las elevadas concentraciones de nacl y edta, y la digestión extensa con proteasas y nucleasa micrococal causan la desnaturalización de las placas. Los resultados nanotribológicos indican que las placas en condiciones estructurantes (mg2+ 5 mm) tienen un coeficiente de fricción (cf) relativamente elevado (cf aprox. 0.3), el cual es marcadamente reducido cuando se añaden elevadas concentraciones de nacl o edta (cf aprox. 0.1). La digestión con proteasas incrementa el coeficiente de fricción (cf aprox. 0.5), pero la fricción más elevada se observa cuando el dna se rompe por acción de la nucleasa micrococal (cf aprox. 0.9), indicando que el dna es el componente estructural principal de las placas. Estos resultados indican que los cromosomas nativos están formados por el apilamiento de placas, que están compuestas por una red bidimensional flexible y mecánicamente resistente de dna y proteínas.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estructura y propiedades de las placas de cromatina de los cromosomas metafásicos: estudio mediante técnicas de microscopíatem, afm y espectroscopia de fuerza atómica.«
- Título de la tesis: Estructura y propiedades de las placas de cromatina de los cromosomas metafásicos: estudio mediante técnicas de microscopíatem, afm y espectroscopia de fuerza atómica.
- Autor: Isaac Gállego Ossul
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 15/09/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Joan Ramon Daban Balaña
- Tribunal
- Presidente del tribunal: montserrat Ponsa fontanals
- albert Jordan valles (vocal)
- (vocal)
- (vocal)