Tesis doctoral de Angel De La Puerta Garcia Barroso
La b-lactoglobulina (blg) es el principal alergeno presente en leche de vaca. Para evitar las alergias provocadas por esta proteína se han comercializado fórmulas hipoalergénicas, en las que se ha intentado eliminar este alergeno. sin embargo, se han descrito casos de alergia tras la ingestión de estos alimentos, que hacen pensar en la existencia de cantidades residuales de la proteína o de sus fragmentos peptídicos. para realizar la determinación de este alergeno en concentraciones tan bajas en matrices complejas como son los alimentos es necesario disponer de un método de análisis de blg altamente selectivo y sensible, con elevada precisión, rápido y automatizable, condiciones que cumplen los inmunoensayos en sistemas cromatográficos. por tanto, se ha llevado a cabo el desarrollo de un método inmunocromatográfico empleando como relleno cromatográfico un soporte con anticuerpos específicos antiblg para la cuantificación a niveles traza de blg en fórmulas hipoalergénicas basadas en proteínas de leche de vaca. La inyección del preparado hipoalergénico en la columna origina la retención selectiva de blg y sus fragmentos peptídicos antigénicos. Una etapa posterior de reconocimiento en la propia columna con un anticuerpo anti blg marcado con una sonda enzimática seguida de la inyección de sustrato de la reacción enzimática origina una cantidad de producto proporcional a la cantidad de antígeno existente en la muestra, que se cuantifica en el detector del sistema cromatográfico. El método desarrollado se ha identificado con el nombre eliac (enzyme-linked immunoaffinity chromatography). el estudio se ha estructurado del siguiente modo: 1) estudio de diversos procedimientos de unión covalente de antiblg a soportes cromatográficos de diferentes características, 2) selección y evaluación, mediante inmunodotting, de las soluciones a emplear durante el inmunoensayo en columna, 3) caracterización de las
Datos académicos de la tesis doctoral «Desarrollo de metodos inmunocromatograficos para la determinacion de trazas de b lactoglobulina.«
- Título de la tesis: Desarrollo de metodos inmunocromatograficos para la determinacion de trazas de b lactoglobulina.
- Autor: Angel De La Puerta Garcia Barroso
- Universidad: Alcalá
- Fecha de lectura de la tesis: 17/09/2003
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Frutos Gomez Mercedes De
- Tribunal
- Presidente del tribunal: María teresa Galceran huguet
- Elena Molina hernandez (vocal)
- De bolos pi carmen (vocal)
- carmen Guiberteau cabanillas (vocal)