Tesis doctoral de David Díaz Martín
Antecedentes: los estándares internos han sido utilizados en métodos de citometría de fuljo para enumerar subpoblaciones linfoides y progenitores hematopoieticos ex vivo. Sin embargo, los métodos actualmente disponibles no pueden ser realmente aplicados al análisis de células cultivadas debido a la existencia de muerte celular durante ensayos, in vitro. Materiales y métodos: esta tesis propone un nuevo método para la enumeración de células viables y no viables y de células proliferantes y no proliferantes en cultivo. Las células fueron cuantificadas mediante un estándar interno de referencia de micropartículas y la discriminación entre células viables y no viables se realizó mediante el marcaje doble con anexina v y 7- aminoactinomicina que permite el marcaje doble de antígenos de superficie. .Resultados: el método es más preciso, exacto y sensible que la microscopía óptica convencional y los contadores celulares automáticos. Además, puede ser utilizado para medir exactamente el numero de células apoptóticas en un cultivo celular heterogéneo. Conclusiones: el método de enumeración celular ratiométrico por citometría de flujo desarrollado en esta tesis es más exacto, preciso y sensible que la microscopia óptica convencional y los contadores celulares automáticos y permite la definición del inmunofenotipo de las poblaciones celulares en un cultivocelular heterogéneo.
Datos académicos de la tesis doctoral «Desarrollo de nuevas metodologías para la enumeración de células en cultivo y la cuantificación de la apoptosis«
- Título de la tesis: Desarrollo de nuevas metodologías para la enumeración de células en cultivo y la cuantificación de la apoptosis
- Autor: David Díaz Martín
- Universidad: Alcalá
- Fecha de lectura de la tesis: 12/12/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Melchor Alvarez De Mon Soto
- Tribunal
- Presidente del tribunal: julia Bujan varela
- José Antonio Girón gonzález (vocal)
- Antonio De la hera martínez (vocal)
- José Alberto Orfao de matos correia e vale (vocal)