Tesis doctoral de Alicia Garcia Herrero
El análisis conformacional llevado a cabo mediante una combinación de medidas de rmn y cálculos teóricos de mecánica molecular demuestra que en los análogos de lactosa, carbalactosa (4) y carbaiminolactosa (5), donde el oxígeno endocíclico de la función acetálica ha sido sustituido por un grupo metileno, la población conformacional del mínimo syn/syn no supera el 20% de la población global de ambas moléculas. Es decir, puesto que 4 y 5 no presentan efecto exoanomérico, las interacciones desestabilizantes de tipo 1,3 entre el sustituyente en posición dos del residuo no reductor y el resto de glucosa gobiernan su distribución conformacional. La presencia del oxígeno endocíclico en glactósidos es necesaria para el correcto reconocimiento de análogos de sustrato por la beta-galactosidadasa de e.Coli. se ha determinado que la actividad residual observada en la beta-galactosidasa de e.Coli mutante e537q está provocada por una contaminación por trazas de la enzima silvestre. de los estudios por rmn, realizados mediante experimentos tr-noesy, llevados a cabo con metil alfa-lactósido (1), metil beta-c-lactósido (2), metil alfa-tiolactósido (3) y metil beta-alolactósido (6) en presencia de la beta-galactosidasa mutante e537q de e.Coli, se puede concluir, en primer lugar, que los ligandos deben deformarse para ser reconocidos e interaccionar con el centro activo de la proteína y, en segundo lugar, que esta deformación se produce sobre diferentes ángulos de la molécula, en función de la naturaleza del átomo que ocupa la posición interglicosídica. así, los análogos 2 y 3, con un átomo de carbono o azufre en la posición interglicosídica, respectivamente, sufren la deformación sobre el ángulo interglicosídico, siendo reconocidos en la conformación anti/syn, muy minoritaria cuando ambas moléculas se encuentran en estado libre en disolución acuosa. en cambio, en los compuestos 1 y 6, derivados metilados de
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio por resonancia magnética nuclear del reconocimiento de carbohidratos por enzimas glicosidasas: deformaciones geométricas de galactósidos en presencia de la beta-galactosidasa de escherichia coli.«
- Título de la tesis: Estudio por resonancia magnética nuclear del reconocimiento de carbohidratos por enzimas glicosidasas: deformaciones geométricas de galactósidos en presencia de la beta-galactosidasa de escherichia coli.
- Autor: Alicia Garcia Herrero
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 28/10/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco Javier Cañada Vicinay
- Tribunal
- Presidente del tribunal: manuel Martin lomas
- Elena Bogonez peláez (vocal)
- José Luis Garcia lopez (vocal)
- Juan alfonso Ayala serrano (vocal)