Tesis doctoral de Judit Villén Romero
En la presente tesis se describe la mimetización funcional de un sitio antigénico discontinuo viral mediante construcciones peptídicas. Se toma como modelo el sitio d del virus de la fiebre aftosa (vfa) y las construcciones diseñadas se evalúan por su potencial aplicación como vacuna sintética, por sí solas o en combinación con péptidos que representan otros sitios antigénicos continuos del mismo virus. la mimetización de los sitios antigénicos discontinuos, a diferencia de los continuos requiere un conocimiento detallado de la estructura del epítopo y los residuos responsables de la interacción con anticuerpos, y su principal dificultad se halla en la incorporación de los fragmentos implicados en el reconocimiento en una disposición casi-nativa. En base a estos requerimientos estructurales se procede a un diseño racional mediante modelado molecular y asistido por dinámica molecular. La primera construcción, d8 ensambla los tres fragmentos peptídicos donde se hallan los cinco aminoácidos clave mediante un enlace disulfuro entre los dos más cercanos y una hélice de poliprolina entre los más distantes. Ambas conexiones se realizan entre residuos internos en la cápside, evitando así distorsiones en la superficie de interacción. A pesar de la falta de reconocimiento entre d8 y los anticuerpos monoclonales (mabs) del virus, esta construcción es capaz de inducir en cobaya y bovinos (un huésped natural de la enfermedad) la producción de anticuerpos que reconocen específicamente el sitio d del vfa y neutralizan parcialmente su infectividad en cultivo celular; además se observa la protección parcial de los animales ante posteriores exposiciones al virus. La evaluación de péptidos dn análogos, diferenciados en la longitud del espaciador de poliprolina, y seleccionados mediante dinámica molecular no supone ninguna mejora importante respecto a la construcción original. el empleo de técnicas de mapeo epitópi
Datos académicos de la tesis doctoral «Aproximaciones peptídicas a la definición y reconstrucción de un sitio antigénico discontinuo viral«
- Título de la tesis: Aproximaciones peptídicas a la definición y reconstrucción de un sitio antigénico discontinuo viral
- Autor: Judit Villén Romero
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 16/10/2003
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- David Andreu Martínez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: fernando Albericio palomera
- baldomero Oliva Miguel (vocal)
- Francisco Sobrino castello (vocal)
- nuria Verdaguer massana (vocal)