Tesis doctoral de Sebastián Martín Real
La familia de factores de transcripción e2f juega un papel fundamental en la proliferación celular. En este proceso, debe existir un crecimiento que mantenga un tamaño celular constante durante cada ciclo celular. E2f siempre ha sido reportado como un importante inductor del ciclo celular, pero no había sido relacionado con el crecimiento de la célula. En esta tesis se demuestra que e2f1 es capaz de inducir el crecimiento celular mediante la activación de la vía de mtorc1. La inducción del crecimiento por parte de e2f1 es dependiente de su unión al dna y de su actividad transactivadora, demostrando que la inducción de un programa de expresión génica es requerido en este proceso. A diferencia de e2f1, e2f3 no es capaz de activar la vía de mtor, reflejando que la inducción del crecimiento se encuentra restringida a algunos miembros de e2fs. El efecto de e2f1 en la activación de mtor no es dependiente de de akt, erk o myc. Más aún, la sobreexpresión de tsc2 no interfiere en el efecto de e2f1. E2f1 e insulina juntos poseen un efecto aditivo en la activación de s6k, y la activación de e2f1 produce una inhibición parcial de la vía pi3k, sugiriendo fuertemente que e2f1 utiliza una vía independiente de pi3k/tsc2 para la activación de mtorc1. Por este estudio, e2f1 emerge como una clave molecular que integra la división celular y el crecimiento, procesos esenciales para la proliferación celular. las modificaciones post-traduccionales que afectan a e2f1 modulan su estabilidad, su afinidad por el dna y otras proteínas, y hasta su actividad transcripcional. La fosforilación en serina 403 ha sido planteada por nuestro y por otros grupos de ser ejercida por diferentes quinasas en ensayos in vitro. La falta de un anticuerpo que reconociera los cambios en esta fosforilación ha complicado el avance de los estudio in vivo. En esta tesis se generó un anticuerpo fosfo-específico que diferenció correctamente el estado de fosorilación de la serina 403 de e2f1, tanto en experimentos in vitro como in vivo. Utilizando este anticuerpo, se descubrió que la fosforilación de e2f1 es realizada in vivo, y que ocurre principalmente en el núcleo. La glicógeno sintasa quinasa 3 (gsk3), así como la p38 mapk no parecen estar involucradas en la fosforilación in vivo de e2f1. El daño al dna induce la fosforilación de e2f1 en serina 403 independiente de las quinasas atm/atr y de p38. Curiosamente, la sobreexpresión de p38 generó un aumento de la estabilidad de e2f1, pero que fue independiente de la serina 403. Nuestro trabajo aporta una fuerte evidencia de que esta modificación post-traduccional afecta a la actividad transcripcional de e2f1, y que aparentemente afectaría de forma específica solo a algunos de los genes diana de e2f1. Este trabajo sugiere una nueva función asociada a la fosforilación de la serina 403.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio del papel de e2f1en el crecimiento celular y la participación de la serina 403 en la regulación de la actividad transcripcional de e2f1«
- Título de la tesis: Estudio del papel de e2f1en el crecimiento celular y la participación de la serina 403 en la regulación de la actividad transcripcional de e2f1
- Autor: Sebastián Martín Real
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 16/12/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Albert Tauler Girona
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Carlos Ciudad gómez
- manel Joaquin caudet (vocal)
- (vocal)
- (vocal)