Tesis doctoral de óscar Maestro Garriga
La 20-hidroxiecdisona (20e) es una de las hormonas más importantes de los insectos ya que controla diferentes procesos del desarrollo y la reproducción. Actúa a través de la unión a su receptor heterodimérico formado por dos receptores nucleares, ecr y usp-rxr. El estudio de la función de usp-rxr se ha llevado a cabo exclusivamente en el insecto holometábolo drosophila melanogaster. En hemimetábolos, sin embargo, no se ha podido analizar su función ya que estos insectos más primitivos no son modificables genéticamente. El desarrollo de la metodología de silenciamiento génico por rna de interferencia (rnai) puede resolver estas limitaciones. en la presente tesis se estudia la función de usp-rxr durante el desarrollo del insecto hemimetábolo blattella germanica. Se han identificado dos isoformas de este factor que difieren en una inserción /delección de 23 aminoácidos del lbd. Mediante ensayo emsa con proteínas obtenidas por tnt se ha comprobado que las dos isoformas de bgrxr tienen diferente capacidad de unión a dna en respuesta a la 20e. a continuación se ha comprobado el efecto de la 20e sobre la transcripción de bgrxr mediante incubaciones de células de la línea um-bge-1 y de cuerpos grasos in vitro, y se han analizado por rt-pcr los patrones de expresión de este gen durante el desarrollo y la reproducción. Así, se ha comprobado que la 20e no regula bgrxr a nivel transcripcional y esto resulta en una expresión constitutiva en la mayoría de los tejidos analizados. por último se han analizado las funciones de bgrxr durante el desarrollo embrionario, ninfal y adulto mediante rnai in vivo. De este modo se ha observado que durante las primeras horas de la embriogénesis bgrxr es necesario para que se produzca correctamente la proliferación de las células que formarán la banda germinal. Paralelamente, se ha comprobado que bgecr, el otro componente del receptor de la 20e también es necesario en este proceso. por otro lado, durante el último estadio ninfal la función de bgrxr es indispensable para que se produzca correctamente la écdisis a adulto. Así, la interferencia de este factor resultaba en insectos incapaces de mudar que tienen duplicadas las estructuras de origen ectodérmico. Asimismo, tras la muda imaginal bgrxr es necesario para que se produzca la degeneración de la glándula protorácia, así como la correcta extensión y esclerotización de las alas. finalmente, durante el estadio adulto bgrxr se expresa en el folículo de los oocitos básales donde la 20e controla la coriogénesis al final del ciclo gonadotrófíco. Además, bgrxr también es necesario para que se produzca la síntesis de la hormona juvenil (hj) en los corpora allata (ca) de las hembras adultas. Esta función también se ha definido para bgftz-f1, otro receptor nuclear de la cascada de la 20e. Este factor controla la actividad biosintética de los ca a través de la regulación de la bghmg-coa-sintasa, un gen clave en la ruta biosintética de la hj.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio del receptor de la 20-hidroxiecdisona en el insecto hemimetábolo blatella germanica (l.) (dictyoptera, blattellidae). caracterización del receptor nuclear bgrxr«
- Título de la tesis: Estudio del receptor de la 20-hidroxiecdisona en el insecto hemimetábolo blatella germanica (l.) (dictyoptera, blattellidae). caracterización del receptor nuclear bgrxr
- Autor: óscar Maestro Garriga
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 18/04/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- David Martín Casacuberta
- Tribunal
- Presidente del tribunal: marina Blas esteban
- m. Luisa Vilaplana holgado (vocal)
- gerardo Jiménez cañero (vocal)
- María dolors Piulachs baga (vocal)