Tesis doctoral de Ana María Dos Santos Rocha
En los vertebrados, las gonadotrofinas hipofisarias, la hormona estimulante de los folículos (fsh) y la hormona luteinizante (lh) juegan un papel fundamental en la regulación de los procesos de gametogenesis y esteroidogenesis gonadal. Para ejercer sus funciones biológicas, las gonadotrofinas se deben unir y activar receptores específicos localizados en la superficie de las células diana. Esta tesis doctoral tuvo como objetivo profundizaren el conocimiento del papel de las gonadotrofinas en la función reproductora de un teleósteo marino, la lubina (dicentrarchus labrax), mediante el estudio de sus receptores. se han aislado y caracterizado los cdnas que codifican los receptores de fsh, lh y tsh de lubina (sbsfshr, sbslhr y sbstshr, respectivamente). Las proteínas codificadas contienen todos los atributos estructurales que caracterizan a los receptores de hormonas glicoproteicas en vertebrados. Los receptores de lh y tsh de lubina están muy conservados respecto a otros receptores de peces y mamíferos; sin embargo, el sbsfshr contiene varias diferencias destacables. Entre ellas, un dominio n-terminal rico en cisteínas diferente en cuanto a tamaño y numero de cisteínas, y la presencia de una repetición rica en leucinas extra numeraria, lo que sugiere la existencia de un dominio de unión al ligando con distinta curvatura y tamaño respecto al fshr humano, que podría influir en el modo en el que el receptor reconoce a la hormona. los análisis de expresión han demostrado que el sbsfshr se expresa exclusivamente en tejidos gonadales, concretamente en las cubiertas de los folículos en fases previtelogénicas y de vitelogénesis temprana. Por el contrario, los mrna de los genes sbslhr y sbstshr se encontraron ampliamente distribuidos en tejidos somáticos de lubina, de manera similar a sus congéneres en mamíferos y a otros lgrs. Comparadas las estructuras genómicas primarias de los receptores de gonadotrofinas de lubina y de otros vertebrados, se verifica que durante la evolución, la estructura del sbslhr se ha conservado más que la del gen sbsfshr, particularmente en el dominio extracelular. el sbsfshr recombinante se estimula específicamente por bfsh, mientras que el sbslhr se activa por ambas blh y bfsh. Sin embargo, se observó una estimulación específica cuando se usaron gonadotrofinas recombinantes de lubina. Este comportamiento se parece al descrito para los receptores de gonadotrofinas de mamíferos pero difiere de los estudios realizados en otras especies de peces, en las que se observó una activación promiscua. se desarrollo un método de rt-pcr cuantitativo para medir los perfiles de expresión de los receptores de las hormonas glicoproteicas durante la primera maduración gonadal de machos y hembras de lubina. Asimismo, se investigaron posibles relaciones entre los perfiles de expresión del sbsfshr y sbslhr y el de la expresión de la proteína responsable de la respuesta aguda de la esteroidogénesis (star) y los perfiles plasmáticos de hormonas esenciales en el proceso reproductor. La expresión del sbsfshr se asocia con estadios tempranos del desarrollo gonadal, pero se observan igualmente niveles elevados de expresión durante el periodo de espermiación en machos y maduración-ovulación en hembras. El perfil de expresión del sbslhr en ambos sexos indica la implicación de la lh en la regulación de las fases finales de la maduración y la ovulación/ espermiación de los gametos de peces, tal y como se ha sugerido previamente. La expresión de star está altamente correlacionada con la expresión del lhr. Los valores más elevados de expresión de este gen se observaron en las fases de espermiación y maduración-ovulación en machos y hembras respectivamente. No se observó una relación fuerte entre la expresión de los receptores de las gonadotrofinas y los niveles plasmáticos de los esteroides sexuales analizados. por primera vez en un vertebrado se describen las variaciones estacionales de expresión de un tshr gonadal, éstas indican que este receptor esta regulado ejerciendo un papel en la fisiología gonadal de lubina. La expresión del sbstshr en hembras sugiere que éste podría participar en la vitelogenesis y en la regulación de la maduración de los gametos y la ovulación, mientras en machos, el tshr estaría implicado en la regulación de procesos que ocurren durante las primeras etapas del desarrollo gonadal, y también en la maduración de los gametos y la espermiación. summary in vertebrates, the pituitary gonadotropins, follicle-stimulating hormone (fsh) and luteinizing hormone (lh), are the main regulators of gametogenesis and gonadal hormone production. To exert their biological actions, gonadotropins must bind to, and activate specific cell-surface receptors. To help clarifying the physiological roles of gonadotropins in the regulation of sea bass (dicentrarchus labrax) reproductive function, cdnas encoding a fsh receptor (sbsfshr) and a lh receptor (sbslhr) were cloned and characterized. Their gene structure, expression, and functional activity were evaluated. In addition, changes in the expression of sbsfshr and sbslhr genes during the sea bass reproductive cycle were studied and the relatedness of these expressions with gonadal development and the temporal profile of plasma sexual hormones and the sterodogenic acute regulatory protein evaluated. Finally, a possible participation of sea bass tshr in the regulation of the reproductive function is investigated.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterizacion molecular de los receptores de gonadotrofinas de lubina (dicentrarchus labrax)«
- Título de la tesis: Caracterizacion molecular de los receptores de gonadotrofinas de lubina (dicentrarchus labrax)
- Autor: Ana María Dos Santos Rocha
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 11/06/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Manuel Carrillo Estévez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: manuel Tena sempere
- monika Schmitz (vocal)
- josep Planas (vocal)
- Francisco Prat baella (vocal)