Tesis doctoral de María Lucas Gil
El páncreas es una glándula con una porción tanto endocrina como exocrina que regula la absorción y utilización de los nutrientes digeridos. Concretamente las células beta son las responsables del mantenimiento de los niveles de glucosa del organismo, y en el caso de enfermedades como la diabetes mellitus tipo 1 son destruidas por mecanismos autoinmunes. Para sustituir este tipo celular sería interesante aislar células madre adultas y dirigir su diferenciación hasta el fenotipo de célula productora de insulina. los transportadores de resistencia a multidrogas abcg2 se han propuesto recientemente como marcadores de células troncales en distintos tejidos adultos. Concretamente en el páncreas, donde aun hay controversia sobre el origen y localización de las células troncales, este marcador podría identificar a la posible población celular troncal con implicaciones en el proceso de transdiferenciación endocrina. la aproximación experimental de esta tesis se basa en aislar la población abcg2+ de páncreas de rata y realizar una caracterización de su fenotipo y propiedades. nuestros resultados indican que las células obtenidas corresponden al fenotipo de células pancreáticas estrelladas tanto en estado quiescente como en estado activo. Además, hemos detectado la presencia de marcadores de células troncales adultas de distintas estirpes celulares en el cultivo: nestina, ncam, fgfr1-lllb, thy-1,1. Posteriormente hemos evaluado su capacidad de transdiferenciación en fenotipo endocrino, concretamente de célula productora de insulina, a través del cultivo en matrigel (matriz extracelular comercial) y exendin-4 (análogo de glp-1). Este tratamiento induce en las células estrelladas en estado quiescente la expresión del transportador glut2, las convertasas de insulina pc1/3, pc2, así como la presencia de péptido c y la secreción de insulina en respuesta a estimulación con glucosa. la secreción de factores solubles por parte de las células estrelladas con fenotipo activo es un hecho ampliamente conocido, así que nos planteamos caracterizar mediante proteómica el secretoma de estas células, y estudiar posibles efectos paracrinos de las moléculas identificadas sobre la población ductal. El medio condicionado provinente de células estrelladas pancreáticas provoca una inhibición significativa de la proliferación de las células arip tratadas, así como cambios de expresión génica en las mismas (disminución del marcador ductal ck19, e incremento del factor de trascripción pdx1, crucial en la diferenciación endocrina). Los resultados sugieren que tgfbeta1 secretado por las células pancreáticas estrellada inhibe la proliferación de las células arip ductales tratadas con medio condicionado. Del estudio del secretoma destacamos la identificación de 37 proteínas solubles y 24 proteínas intracelulares. Algunas de estas moléculas identificadas por primera vez en el secretoma de este tipo celular como pedf o lif, podrían ejercer los cambios de expresión génica observados en las células arip tratadas con medio condicionado provinente de células pancreáticas estrelladas. en resumen, tanto las células pancreáticas estrelladas como su secretoma abren nuevas vías de investigación con implicaciones en procesos de regeneración pancreática.
Datos académicos de la tesis doctoral «Células pancreáticas estrelladas: implicación en el proceso de transdiferenciación celular endocrina y caracterización de su secretoma«
- Título de la tesis: Células pancreáticas estrelladas: implicación en el proceso de transdiferenciación celular endocrina y caracterización de su secretoma
- Autor: María Lucas Gil
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 29/01/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Ramón Gorris De BarbarÁ
- Tribunal
- Presidente del tribunal: ricardo Pujol borrell
- Manuel Puig domingo (vocal)
- didac Mauricio puente (vocal)
- rosa Mª Gasa arnaldich (vocal)