Tesis doctoral de Andreia Carvalho
La biología sintética es una disciplina floreciente que representa una gran promesa, al tratar de construir sistemas biológicos que pueden probar los límites de nuestra comprensión. En la última década, el campo ha avanzado mucho con varios circuitos de genes sintéticos que han sido desarrollados, incluyendo los interruptores genéticos, los osciladores, los módulos de comunicación intercelular y redes de comunicación multicelulares, aunque la gran mayoría fueron construidos en las bacterias y levaduras. En esta tesis se establece el diseño, construcción y caracterización de un sistema artificial sintético de comunicación intercelular en células de mamífero. Este sistema fue utilizado para diseñar patrones espaciales: gradientes de la activación o de represión de un gen reportero fluorescente en un campo de células. El sistema modelo utilizado fue la línea celular de células de riñón canino madin-darby (mdck), que forma una monocapa polarizada que encierra un lumen lleno de líquido (quistes) cuando crecen en una matriz de colágeno. Estos quistes fueron utilizados como un para la ingeniería de redes de genes sintéticos y formación de patrones, en un contexto tridimensional. Para esto inicialmente desarrollé un método para transfectar quistes mdck a nivel local, logrando distintas regiones de transfección. Entonces construí y caractericé un gen reportero fluorescente que es inducido por el factor de crecimiento de hepatocitos y reprimido por una variante truncada, nk4. Por último, diseñé una plataforma de síntesis espacial del patrón para la microscopía de campo ancho, basado en la expresión y secreción localizada de hgf o nk4. El primero difunde a partir de células origen y modula la formación de túbulos y la expresión del gen reportero fluorescente en las células del receptor, mientras que nk4 reprime este efecto.
Datos académicos de la tesis doctoral «Engineering synthetic spatial patterning systems in mammalian cells«
- Título de la tesis: Engineering synthetic spatial patterning systems in mammalian cells
- Autor: Andreia Carvalho
- Universidad: Pompeu fabra
- Fecha de lectura de la tesis: 03/03/2011
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Mark Isalan
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Garcia de herreros madueño
- ricard Vicente sole (vocal)
- (vocal)
- (vocal)