Tesis doctoral de Luis G. Rodríguez Moreno
En esta tesis doctoral, se han desarrollado las herramientas y sistemas modelo vegetales necesarios para llevar a cabo el estudio de los mecanismos moleculares y celulares implicados en la patogenicidad y virulencia de pseudomonas savastanoi pv. Savastanoi (psv), agente bacteriano causante de la tuberculosis del olivo. la utilización de plantas de olivo cultivadas y mantenidas en condiciones in vitro ha permitido evaluar la virulencia de cepas de p. Savastanoi pv savastanoi y neril, aportando un sistema alternativo a los plantones de olivo adultos en los que reproducir de forma rápida y poco costosa los síntomas característicos de la enfermedad. el sistema modelo de plantas de olivo in vitro ha permitido, en combinación con técnicas de microscopia óptica y electrónica, estudiar de forma detallada y completa la fase endofítica de psv. En este sentido se ha llevado a cabo la construcción de un plásmido de amplio rango de hospedador desde el que se expresó la proteína verde fluorescente (gfp) y con el que se ha llevado a cabo la detección in vivo e in situ de las células de psv a lo largo del proceso de formación de tumores. además del cultivo de olivo in vitro, en este trabajo se ha evaluado la capacidad de p. Savastanoi pv. Savastanoi ncppb 3335 de infectar plantas del hospedador no natural phaseolus vulgaris (judía), en comparación con p. Savastanoi pv. Phaseolicola 1448a, cepa patógena que induce una reacción compatible en esta planta, y p. Syringae pv tomato dc3000, cepa no patógena en judía que induce en la misma una reacción incompatible. Estas tres interacciones se analizaron mediante fluorescencia de imagen de la clorofila, describiéndose parámetros fotosintéticos que permien detectar las distitas interacciones bacterianas en áreas asintomáticas de la hoja. los dos sistemas modelo vegetales puestos a punto en este trabajo, plantas de olivo in vitro y plantas de judía, han permitido analizar la virulencia y estructural tumoral inducida por una cepa mutante afectada en el ttss (ncppb 3335-hrpa) y dos cepas mutantes curadas de plásmidos (ncppb 3335- ppsv48a y ncppb 3335- ppsv48ab). Los resultados obtenidos con la cepa ncppb 3335-hrpa en ambos sistemas vegetales indican que el tiss es necesario para el crecimiento y supervivencia de la bacteria, tanto en los tejidos vegetales de las plantas hospedadoras como no hospedadoras. En cuanto a las cepas curadas de plásmidos, los resultados obtenidos en este trabajo indican que alguno/s de los genes localizados en el plásmido ppsv48a, o en ambos plásmidos, podrían intervenir en el reconocimiento de este patógeno por los sistemas de defensa de la planta.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio de la interacción pseudomonas savastanoi pv. savastanoi-planta huésped mediante técnicas de imagen«
- Título de la tesis: Estudio de la interacción pseudomonas savastanoi pv. savastanoi-planta huésped mediante técnicas de imagen
- Autor: Luis G. Rodríguez Moreno
- Universidad: Málaga
- Fecha de lectura de la tesis: 07/11/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Cayo Juan Ramos Rodriguez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Heredia bayona
- emilia López solanilla (vocal)
- matilde Barón ayala (vocal)
- ramón Peñalver navarro (vocal)