Tesis doctoral de Roberto Martin Jean Mairet
Función de pkd y su sustrato kidins220 en linfocitos t polarizados resumen kidins220 (kinase d interacting substrate of 220 kda) es una proteína integral de membrana descubierta recientemente, cuya expresión es mayoritaria en cerebro y en sistema nervioso. Originalmente identificada como un sustrato de la proteína quinasa d1 (pkd1) su función es aún desconocida. En la primera parte de esta tesis, demostramos que kidins220 se expresa también en linfocitos t. En células t polarizadas, esta nueva molécula se concentra en la parte trasera o urópodo, donde colocaliza con las moléculas de adhesión agrupadas en esta región como icam-3, cd43 y cd44. Por otro lado, hemos podido detectar por diversos métodos la expresión de caveolina-1 en varias líneas de linfocitos t, cuestión que ha sido motivo de controversia en los últimos años. Nuestros resultados muestran además que kidins220 interacciona con caveolina-1 y está embebido en las balsas lipídícas en el urópodo. A su vez, describimos la asociación de kidins220 con icam-3 y las proteínas erm en linfocitos t polarizados, y demostramos que tanto la distribución asimétrica de kidins220 como su asociación con icam-3 dependen de mecanismos moleculares que involucran al citoesqueleto de actina y a las vías de señalización de la proteína quinasa c (pkc). Adicionalmente, el presente estudio señala la participación de kidins220 en la adhesión homotípica de las células t asi como en la quimiotaxis en respuesta a sdf-1 , sugiriendo además su posible implicación en la polaridad celular. En segundo término, mostramos que pkd también interacciona y colocaliza con icam-3 en el urópodo de los linfocitos t polarizados de un modo regulado por las vías de pkc. En este modelo celular, pkd también interacciona con proteínas erm. Mientras que estas últimas no son fosforiladas por pkd, icam-3 es un buen sustrato para esta quinasa, conteniendo en su dominio citoplásmico varios sitios de fosforilación posibles. Por último, pkd juega un papel fundamental en funciones cruciales de los linfocitos t. Por un lado, incrementa la adhesión celular a fibronectina de una manera independiente de su estado de activación, mientras que su actividad quinasa es capaz de potenciar fuertemente la adhesión homotípica promovida por esteres de forbol o por activación de icam-3. De acuerdo con estos resultados, anticuerpos bloqueantes de icam-3 inhiben el aumento de las interacciones intercelulares consecuencia de expresar pkd ectópicamente. Además, la puesta en marcha de icam-3 induce una activación de pkd, apareciendo fosforilada en la ser916 y translocada al centro de grupos pluricelulares que se generan en respuesta a anticuerpos anti-icam-3 pro-agregatorios. Finalmente, la expresión de pkd promueve la motilidad y la quimiotaxis en respuesta a sdf-1 de células t. Nuestros datos representan la primera evidencia de la participación de pkd en las vías de señalización de quimioquinas y por lo tanto en respuestas quimiotácticas, procesos de vital importancia para la función de los linfocitos t y la respuesta inmune.
Datos académicos de la tesis doctoral «Función de pkd y su sustrato kidins220 en linfocitos t polarizados.«
- Título de la tesis: Función de pkd y su sustrato kidins220 en linfocitos t polarizados.
- Autor: Roberto Martin Jean Mairet
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 19/04/2007
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Teresa Iglesias Vacas
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Francisco Sanchez Madrid
- José Luis Rodriguez fernandez (vocal)
- Miguel angel Alonso lebrero (vocal)
- María concepcion Montoya sanchez (vocal)