Tesis doctoral de Sonia Alcalá Sánchez
Recientemente han sido secuenciados un gran número de genomas entre los que se encuentra el genoma humano. El siguiente paso consiste en la anotación funcional de los genes que componen dichos genomas y para ello se hace necesario el desarrollo de nuevas plataformas experimentales de alta capacidad que permitan el manejo simultáneo de un gran número de genes. En este trabajo, se describe un sistema de alto rendimiento diseñado para identificar cdnas cuya sobreexpresión induce modalidades morfológicamente diferentes de muerte celular. La metodología incorpora dos pasos robotizados, y se basa en la coexpresión de los clones de una genoteca de cdna junto con gfp para revelar las características morfológicas presentadas por las células que están sufriendo un proceso de muerte celular. Empleando este sistema se analizaron 135000 clones de cdna y se obtuvieron 92 moléculas independientes cuya sobreexpresión induce muerte celular. De modo interesante, se diferenciaron tres categorías de muerte, llamadas: apoptótica, vacuolada y autofágica. Entre los clones proapoptóticos, se identificaron cuatro miembros de la familia de transportadores mitocondriales: el transportador mitocondrial de fosfato, el transportador del nucleótido adenina (tipo 3), mtch1 y mtch2. La sobreexpresión de estas moléculas inducía salida de citocromo c de la mitocondria y muerte celular dependiente de caspasa 9. Uno de ellos, el transportador de fosfato, es capaz de interaccionar con los miembros del poro de transición de permeabilidad ant1 y vdac1, y su unión a ant1 se estabiliza en presencia del inductor apoptótico estaurosporina. La depleción de este transportador mediante rnais disminuía la movilización de citocromo c y otros parámetros apoptóticos. Estos resultados atribuyen una función apoptótica no descrita previamente al transportador de fosfato y sugieren que una propiedad común de varios transportadores mitocondriales fue explotada durante la evolución para regular el proceso apoptótico.
Datos académicos de la tesis doctoral «Identificación funcional de moléculas inductoras de muerte celular: implicación del transportador mitocondrial de fosfato en apoptosis«
- Título de la tesis: Identificación funcional de moléculas inductoras de muerte celular: implicación del transportador mitocondrial de fosfato en apoptosis
- Autor: Sonia Alcalá Sánchez
- Universidad: Salamanca
- Fecha de lectura de la tesis: 24/07/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Felipe Pimentel Muiños
- Tribunal
- Presidente del tribunal: xose ramon Garcia bustelo
- almudena Porras gallo (vocal)
- Juan Manuel Zapata hernandez (vocal)
- José Alberto Carrodeaguas villar (vocal)