Tesis doctoral de Laia Caja PuigsubirÁ
En los últimos años nuestro grupo se ha centrado en el análisis de las vías de señalización inducidas por el tgf-b en líneas celulares de carcinoma hepatocelular, con el fin de entender los mecanismos moleculares que confieren resistencia a sus efectos supresores. El tgf-b induce apoptosis en hepatocitos fetales humanos y en algunas células tumorales hepáticas (células fao de hepatoma de rata, células de hepatocarcinoma humano hep3b y plc/prf/5), a través de la producción de especies reactivas del oxígeno (ros) y un incremento de la expresión de la nadph oxidasa nox4. Este proceso coincide con una mayor expresión de las proteínas pro-apoptóticas de la familia bcl-2, tales como bmf o bim. Sin embargo, en estas mismas células, el tgf-b también induce señales anti-apoptóticas, mediadas por la activación del egfr y concomitantes con el incremento en la expresión de proteínas anti-apoptóticas como bcl-xl, mcl1 o hiap1. La inhibición del egfr, ya sea con inhibidores farmacológicos o a través de su silenciamiento con sirna específico, aumenta de manera significativa la respuesta apoptótica al tgf-b, lo que indicaría que el egfr confiere resistencia a la muerte celular inducida por tgf-b. Sin embargo, incluso cuando se inhibe el egfr, algunas células de carcinoma hepatocelular, como hepg2 o sk-hep1, continúan siendo refractorias a la muerte celular inducida por tgf-b. Las células hepg2 son sensibilizadas a la apoptosis inducida por tgf-b cuando se inhibe la vía mek. La inhibición de mek permite al tgf-b inducir apoptosis en estas células, coincidente con un aumento de nox4, regulación de la expresión de diferentes miembros de la familia bcl-2 y activación de la caspasa-3. Por lo tanto, la activación de vías de supervivencia, como el egfr o mek/erk, en células tumorales de hígado confiere resistencia a los efectos supresores del tgf-b impidiendo la expresión de nox4, que es necesaria para la ejecución eficaz de la apoptosis mitocondrial. Finalmente, nuestros resultados indican que el tgf-b es capaz de inducir un proceso de transición epitelio-mesénquima (emt) en hepatocitos fetales humanos, en células fao de hepatoma de rata y en células de hepatocarcinoma humano, hep3b. El tgf-b induce la expresión de snail, coincidiendo con la disminución de caderina-e tanto a nivel de mrna como de proteína. Además, las células muestran una mayor expresión de genes mesenquimales y la reorganización del citoesqueleto de actina en fibras de estrés. Curiosamente, estas células muestran la pérdida de expresión de marcadores hepáticos específicos y aumentan la expresión de marcadores de células madre. De hecho, el tratamiento crónico con tgf-b selecciona una población de células mesenquimales con un fenotipo desdiferenciado, reminiscente de células progenitoras. En resumen, el tgf-b induce diferentes señales en las células tumorales hepáticas, algunas de ellas podrían contribuir a la supresión de tumores (apoptosis), pero otras podrían mediar la progresión y invasión del tumor hepático.
Datos académicos de la tesis doctoral «Mecanismos moleculares que confieren resistencia a la apoptosis por tgf-¿ en células de hepatocarcinoma celular humano«
- Título de la tesis: Mecanismos moleculares que confieren resistencia a la apoptosis por tgf-¿ en células de hepatocarcinoma celular humano
- Autor: Laia Caja PuigsubirÁ
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 08/03/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- María Isabel Fabregat Romero
- Tribunal
- Presidente del tribunal: ramon Bartrons bach
- wolfgang Mikulits (vocal)
- (vocal)
- (vocal)