Tesis doctoral de Clara Pliego Prieto
Con el objetivo de identificar nuevos agentes bacterianos de biocontrol frente a la podredumbre blanca del aguacate causada por r. Necatrix, en esta tesis doctoral se desarrolló un método de selección que permite el aislamiento de cepas bacterianas que colonizan eficientemente la rizosfera de plantas de aguacate. Tras utilizar raices de aguacate como material selectivo de cepas bacterianas capaces de establecerse en las mismas y migrar a los ápices radiculares durante su crecimiento, se aislaron 10 cepas colonizadoras de la raiz, y antagonistas in vitro frente a r. Necatrix. Tres aislados (p. Alcaligenes avo73, p. Putida avo102, p. Pseudoalcaligenes avo110), se seleccionaron por su baja resistencia a antibióticos bacterianos. de entre estos aislados, p. Pseudoalcaligenes avo110 y p. Alcaligenes avo73 mostraron mecanismos similares que podrían contribuir al control efectivo de la enfermedad; sin embargo, a pesar del mayor número de actividades antagonistas mostradas por avo73, esta cepa no es capaz de reducir el desarrollo de la enfermedad a diferencia de avo110 que redujo el desarrollo de los síntomas en un 20%. El análisis a nivel microscópico de las interacciones de estos aislados con la raíz de aguacate y con las hifas de r. Necatrix, reveló que la cepa con capacidad de biocontrol avo110, colonia eficientemente las uniones entre células epidérmicas de la raíz y las hifas del patógeno; sin embargo, avo73 se encontró fundamentalmente asociada a pelos radiculares y en unión débil con el hongo. Las diferentes interacciones bacteria, rizosfera y hongo filopatógeno mostradas parecen estar relacionadas con la diferente capacidad de biocontrol frente a r. Necatrix de estos aislados. para analizar el proceso de infección de raíces de aguacatge por r. Necatrix se contruyó un sector plasmídico pcphy1egfp. Las imágenes obtenidas mediante microscopia láser confocal muestran que la penetración del hongo en la raíz ocurre a través de las lenticelas y de las uniones formadas entre células de la epidermis. Las hifas se observaron por primera vez, atravesando las células de la epidermis, la corteza y los haces vasculares. Estos resultados muestran que la estrategia de colonización de raíz de aguacate llevada a cabo por avo110 se correlaciona con los sitios de la raíz que utiliza r. Necatrix para su penetración, pudiendo suponer este patrón de colonización una barrera física frente a la entrada del patógeno. tras analizar a nivel microscópico las interacciones establecidas por avo110 con la raíz de aguacate y con las hifas del patógeno, se inició un estudio dirigido a la identificación de genes de esta bacteria implicados en la interacción con el hongo patógeno utilizando la técnica signature tagged mutagenesis. Hasta la fecha, se han descrito 7 genes implicados en el metabolismo central, regulación del mensajero secundario (c)-di-gmp y protección de la bacteria frente a las defensas del hongo.
Datos académicos de la tesis doctoral «Multitrophic interactions involved in biological control of evocado white root rot caused by rosellinia necatrix«
- Título de la tesis: Multitrophic interactions involved in biological control of evocado white root rot caused by rosellinia necatrix
- Autor: Clara Pliego Prieto
- Universidad: Málaga
- Fecha de lectura de la tesis: 20/11/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Cayo Juan Ramos Rodriguez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: emilio Montesinos segui
- sandra de Weert (vocal)
- Manuel Espinosa urgel (vocal)
- satoko Kanematsu (vocal)