Tesis doctoral de Neus Abella Marti
La proteína p21 es una proteína inhibidora de los complejos cdk-ciclina. Posteriormente se han descrito otras funciones para p21 algunas de ellas dependen de la localización celular de la proteína. Cuando p21 se localiza en el núcleo actúa como una proteína supresora de tumores, mientras que en citoplasma realiza funciones propias de un oncogén. Hasta el momento solo se ha descrito un mecanismo responsable de la regulación de la localización celular de p21, la fosforilación en el residuo treonina 145. en esta tesis demostramos dos mecanismos de regulación de la localización intracelular de p21: -la fosforilación en la ser153 por pkc impide la entrada de p21 al núcleo. -la desorganización del nucleolo en respuesta al daño en el dna impide la salida de p21 del núcleo hacia el citoplasma. mediante distintas aproximaciones experimentales, hemos observado cómo la quinasa pkc fosforila a p21 en el residuo ser153 y cómo esta fosforilación favorece la localización citoplasmática de p21. Hemos comprobado cómo la cam impide la fosforilación por pkc de la ser153 de p21 y de este modo favorece la localización nuclear de p21cip1. Además, la p21 fosforilada en la ser153 mantiene las mismas funciones analizadas que p21: unión al pcna, inhibición de la síntesis de dna, inhibición de la formación de fibras de estrés y inhibición de la apoptosis. Paralelamente hemos analizado la localización de p21 en respuesta al daño en el dna y hemos visto cómo el daño en el dna (mediante un tratamiento con adriamicina o irradiación de las células con uv) provoca un aumento de los niveles de p21 en el núcleo y una localización de p21 en el nucleolo. La localización de p21 en el nucleolo tiene lugar en una estructura formada dentro del espacio intersticial del nucleolo que definimos en esta tesis como cuerpo o inclusión intranucleolar (inob). Además hemos observado como el inob es una estructura altamente dinámica que no presenta conexión física con el nucleoplasma aunque sí que existe conexión entre las moléculas de p21 del nucleolo y del nucleoplasma como se observa en los experimentos de frap y flip. Hemos analizado cómo la desestructuración del nucleolo, en respuesta al daño en el dna, es previa y independiente a la localización de p21cip1 en el nucleolo. El inob no contiene componentes estructurales del nucleolo (ubf y fibrilarina) y tampoco contiene rna ni dna, aunque si que contiene proteínas del checkpoint y de la regulación del ciclo celular. Además, sumo-1 colocaliza con p21 en el inob en respuesta al daño en el dna. Por otro lado, la desorganización del nucleolo, la inhibición de su actividad transcripcional y la inhibición de la salida de los ribosomas favorece la acumulación de p21 en el núcleo y en el nucleolo. Así pues, hemos visto como el daño en el dna provoca una acumulación de p21 en el inob y esto se debe a la inhibición de la salida hacia el citoplasma de esta proteína. en esta tesis, se describe por primera vez la localización de p21 en el nucleolo. Creemos que esta localización de p21 es de gran importancia para la célula ya que parece indicar que la salida de p21 desde el núcleo al citoplasma se realiza a través del nucleolo. Esta vía de salida de p21 podría ser utilizada también para otras proteínas nucleares como p53 o mdm2.
Datos académicos de la tesis doctoral «Regulación de la localización intracelular de p21cip1«
- Título de la tesis: Regulación de la localización intracelular de p21cip1
- Autor: Neus Abella Marti
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 12/06/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Neus Agell Jane
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Miguel angel Lafarga coscojuela
- jacint Boix torras (vocal)
- (vocal)
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