Aproximaciones biotecnológicas y proteómicas para el análisis de la producción de taxadieno, el primer intermediario específico de la biosíntesis de taxol, en arabidopsis thaliana

Tesis doctoral de Oscar Besumbes Calvo

La ruta biosintética del taxol (o taxol(r)) ha sido objeto de estudio durante los últimos años debido a la gran importancia del citado compuesto por su potente actividad antitumoral y por la dificultad de su suministro a partir de las fuentes naturales. Así recientemente se han clonado diversos enzimas pertenecientes a la vía de síntesis de taxol a partir de diferentes especies de taxus, en una carrera científica para la total comprensión de esta ruta. El primer enzima específico de la ruta de síntesis de taxol es la txs, presente en diferentes especies de taxus y en algunos hongos simbiontes. en este trabajo se ha llevado a cabo la clonación de un cdna codificante para la txs de taxus baccata a partir de células en cultivo. Ensayos de actividad «in vitro» realizados con una versión recombinante txs-his purificada a partir de células de e.Coli, han demostrado que este enzima es activo en transformar ggpp en taxadieno pese a la deleción del posible péptido de tránsito a plastos del extremo amino terminal y a presentar un epítopo rgs-6his en el extremo carboxiterminal. Plantas transgénicas 35s:txs de arabidopsis portadoras de una construcción para la producción constitutiva de la proteína recombinante txs-his procesan la proteína y la localizan correctamente ne plastos. Dichas plantas son capaces de acumular taxadieno, el primer intermediario específico de la ruta de síntesis de taxol. La expresión de txs-his y la consecuente acumulación de taxadieno afectan varios aspectos del desarrollo de las plantas relacionadas con la prudcción de isoprenoides, tales como la germinación, elongación, floración y acumulación de pigmentos fotosintéticos (clorifilas y carotenoides). El análisis de plantas transgénicas dobles que además de txs-his sobreexpresan constitutivamente enzimas limitantes de la síntesis de precursores isoprenoides plastídicos muestra que los niveles de ggpp plastídico son limitantes para la p

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Aproximaciones biotecnológicas y proteómicas para el análisis de la producción de taxadieno, el primer intermediario específico de la biosíntesis de taxol, en arabidopsis thaliana«

  • Título de la tesis:  Aproximaciones biotecnológicas y proteómicas para el análisis de la producción de taxadieno, el primer intermediario específico de la biosíntesis de taxol, en arabidopsis thaliana
  • Autor:  Oscar Besumbes Calvo
  • Universidad:  Barcelona
  • Fecha de lectura de la tesis:  02/04/2004

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Santiago Imperial Ródenas
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: montserrat Busquets abió
    • víctor Manuel González Miguel (vocal)
    • victoria Lumbreras ruiz (vocal)
    • irene Fernandez vidal (vocal)

 

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