Tesis doctoral de Eva Galeano Galan
Introduction: el decualinio (dqa) es un catión lipofílico deslocalizado que ha sido propuesto como un potencial agente antitumoral. Aunque el mecanismo de acción del dqa no es del todo conocido, su citotoxicidad parece deberse a una acumulación selectiva en mitocondrias de células tumorales. En el presente estudio se analizaron los efectos del dqa en las líneas celulares humanas nb4, derivada de una leucemia promielocítica aguda, y k562, derivada de una leucemia mieloide crónica. Métodos: la actividad metabólica se analizó mediante el test del mtt. La muerte celular por necrosis o apoptosis se determinó midiendo el contenido de adn por citometría de flujo, la actividad caspasa se midió mediante colorimetría y la liberación de citocromo c mediante citometría de flujo e inmunotransferencia. La función mitocondrial se estudió por citometría de flujo a través de la medida del potencial de membrana y de la producción de anión superóxido. Los niveles de atp se determinaron mediante bioluminiscencia. El estado redox se detectó mediante medida de los niveles intracelulares de glutation por fluorimetría. La actividad de las proteínas quinasas se analizó mediante inmunotransferencia. Resultados: nuestros resultados muestran un efecto citotóxico del dqa dependiente de la concentración y del tiempo de incubación. El dqa induce en la línea nb4 muerte celular por apoptosis que termina derivando en necrosis, mientras que en la línea k562, más resistentes al dqa, induce necrosis. En ambas líneas celulares, el dqa produce disfunción mitocondrial que implica una despolarización temprana de la membrana mitocondrial seguida de producción de anión superóxido (o2.-) Y disminución de los niveles intracelulares de atp. Además, altas concentraciones de dqa reducen los niveles intracelulares de glutation, lo que causa estrés oxidativo y necrosis en las células nb4 pero no en las k562, donde el efecto es menor. En relación con las rutas de señalización celular, el dqa modula diferentes proteínas quinasas. En las células nb4, éste agente inhibe las rutas raf/mek/erk1/2 y pi3k/akt y activa las mapks jnk y p38, lo que está relacionado con la inducción de apoptosis. En las células k562, sin embargo, el dqa activa las rutas raf/mek/erk1/2 y jnk e inhibe ligeramente la ruta pi3k/akt, sin efecto alguno sobre la actividad de p38 o sobre la muerte celular. Conclusion: este estudio contribuye al conocimiento del dqa como posible agente antitumoral con aplicación potencial en el tratamiento de la leucemia promielocítica aguda y, en cotratamiento con otros agentes como el imatinib, de la leucemia mieloide crónica.
Datos académicos de la tesis doctoral «Efecto del antitumoral decualinio en células derivadas de leucemias humanas«
- Título de la tesis: Efecto del antitumoral decualinio en células derivadas de leucemias humanas
- Autor: Eva Galeano Galan
- Universidad: Alcalá
- Fecha de lectura de la tesis: 13/06/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Pilar Sancho López
- Tribunal
- Presidente del tribunal: eduardo Arilla ferreiro
- María dolores Delgado villar (vocal)
- Francisco Javier Lucio cazaña (vocal)
- patricio Aller tresguerres (vocal)