Tesis doctoral de Paul Christoph SchrÁ¶der SchÁ¤fer
El carcinoma hepatocelular (hcc) es el cáncer primario de hígado más habitual y la tercera causa de muerte por cáncer con más de 600.000 casos diagnosticados anualmente. A pesar de que las principales causas de hcc son conocidas, entre ellas, la infección por vhb, vhc, el consumo de alimentos contaminados con aflatoxina o alcohol, el pronóstico de los pacientes con hcc es malo debido a la agresividad de la lesión en el momento del diagnóstico y a la baja eficaci de la terapias existentes. La mejora del conocimiento sobre la patogénesis molecular del hcc y la identificación de biomarcadores que permitan un diagnóstico precoz, siguen siendo uno de los puntos de mayor interés médico-científico. Desde que cantoni en 1953 la describió por primera vez, se han obtenido un gran número de evidencias indicando el papel fundamental que juega la s-adenosilmetionina (sam) en la biología celular y en el hígado. La reducción de la capacidad de síntesis de sam, bien por inactivación de la metionina adenosiltransferasa (mat), enzima responsable de sus síntesis, bien por el silenciamiento del gen que la codifica, es un factor asociado a la progresión de enfermedades hepáticas así como a la desdiferenciación y transformación neoplásica de los hepatocitos. El estudio transcriptómico mediante micromatrices de adn podría derivar en un mayor conocimiento de las categorías funcionales y genes involucrados en el estado neoplásico y hcc, y de esta manera ser una fuente de nuevas dianas terapéuticas sobre las que dirigir las terapias existentes. mediante la metodología de enriquecimiento funcional gsea se obtuvieron un conjunto de colecciones de genes involucrados en determinadas rutas metabólicas y de señalización del hcc en el modelo de ratón mat1a-/-. Los genes incluídos en estas colecciones se procedieron a validar mediante una tecnología alternativa (tlda) en las muestras de ratón. A continuación, con el fin de validar la huella génica en muestras humanas, se procedió al ánalisis de muestras de hcc, cirrosis y control mediante tldas, obteniéndose un perfil de 18 genes diferenciales para el hcc. Estos genes resumen la transformación neoplásica y la adaptación metabólica del hepatocito. Con el fin de clasificar el tipo de muestra utilizando el menor número de genes posibles, se diseñó un clasificador que eligió 6 genes como los mejores candidatos para asignar correctamente cada etiqueta a cada muestra (control y hcc). Mediante un meta-análisis utilizando datos públicos de microarrays validamos al menos 4 de los genes seleccionados, lo cual confirma su implicación en la patología y su potencial importancia como biomarcadores del hcc. A su vez en sueros de cirróticos y hcc se detectó una alteración de los niveles de la proteína vasp, pudiendose tratar de un potencial biomarcador. es conocida la deficiencia de sam en las enfermedades hepáticas como el hcc, así como el potencial efecto beneficioso de este metabolito en estas células transformadas. Sin embargo todavía no se conocen con exactitud los mecanismos implicados en la respuesta al restablecimiento de los niveles de sam. Con este fin se re-expresó mat1a en células de hepatoma humano alcanzando niveles de mat y sam 3,5 y 7,5 veces respectivamente, situándose en el rango de hepatocitos quiescentes. Mediante proteómica diferencial se estudiaron los mecanismos im plicados en la respuesta al restablecimiento de sam. Tal y como se pudo comprobar mediante las redes de ingenuity pathway analysis se observó una desregulación de la vía de las mapk, el silenciamiento de la vía de supervivencia pi3k/akt, la activación de la apoptosis y la hiperfosforilación de nfkb p65 entre otras alteraciones. A su vez se ha descrito una nueva diana de sam, la arn helicasa ddx3x, relacionada con la progresión de la infección del virus de la hepatitis c y el hcc. Esta regulación dósis y tiempo dependiente fue posteriormente confirmada en otras dos líneas de hepatoma humano, sugiriendo un efecto generalizado.
Datos académicos de la tesis doctoral «S-adenosilmetionina y carcinoma hepatocelular: análisis genómico y proteómico«
- Título de la tesis: S-adenosilmetionina y carcinoma hepatocelular: análisis genómico y proteómico
- Autor: Paul Christoph SchrÁ¶der SchÁ¤fer
- Universidad: Navarra
- Fecha de lectura de la tesis: 30/03/2012
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Joaquin Fernández Irigoyen
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Jesús m. Prieto valtueña
- eva María Bandres elizalde (vocal)
- silvia Barcelo batllori (vocal)
- felix Elortza basterrika (vocal)