Tesis doctoral de Anna Aubareda Rodriguez
Calcineurina es una serina treonina fosfatasa, de la familia de proteínas ppp, cuya actividad es regulada por calcio y calmodulina. Esta fosfatasa es clave en la respuesta aloinmune y es la diana de los principales fármacos inmunosupresores utilizados en la actualidad en la terapia del trasplante, la ciclosporina a y el fk506. Ambos fármacos, aunque en el momento de su incorporación revolucionaron la terapia del trasplante dado que logran suprimir el rechazo agudo al injerto, debido a que son potentes inhibidores de la actividad enzimática de calcineurina, causan un elevado número de efectos secundarios, por lo que para mejorar la terapia del trasplante se hace necesario la búsqueda de nuevas moléculas con potencial inmunosupresor que sean más seguras que las utilizadas en la actualidad. En este sentido, se considera que el estudio de los mecanismos moleculares utilizados por las proteínas endógenas encargadas de la regulación de calcineurina puede aportar nuevas herramientas que contribuyan al desarrollo de nuevos fármacos más seguros y eficientes que los actuales. Con esta intención, el principal objetivo de este trabajo ha sido la caracterización molecular de la proteína reguladora de calcineurina rcan1, anteriormente conocida como dscr1, miembro de la familia de proteínas rcan. En concreto, se ha demostrado que rcan1 es una fosfoproteína in vivo y que la fosforilación de las serinas del motivo flispp correlaciona con la vida media de la proteína. Además, se han caracterizado en rcan1 dos motivos de interacción con la subunidad catalítica de calcineurina cna, uno de ellos denominado c18. Este péptido es responsable de la inhibición de la actividad fosfatasa de calcineurina sobre la familia de factores de transcripción nfat in vivo, lo que impide la translocación de esto al núcleo y, consecuentemente, la expresión génica de las principales citoquinas pro-inflamatorias. Para rcan3, otro miembro de la familia de las rcan, se ha demostrado su capacidad de interaccionar con calcineurina, en este caso exclusivamente a través de un único motivo de interacción, la secuencia aminoacídica c18 de rcan3. Dicho péptido es la secuencia mínima responsable de la inhibición de la actividad enzimática de calcineurina sobre los nfat. Por tanto, este trabajo ha permitido definir un nuevo motivo consenso de regulación de la actividad enzimática de calcineurina para las rcan de vertebrados, la secuencia c18. Al analizar el efecto de este péptido de rcan1 en la actividad enzimática de calcineurina sobre su sustrato de la subunidad rii de la proteína quinasa a se ha demostrado que el mecanismo de inhibición de este péptido no afecta el centro activo enzimático ya que no inhibe la desfosforilación de rii por la enzima. Por tanto, el mecanismo de inhibición del péptido c18 sobre la actividad fosfatasa de calcineurina hacia los nfat es independiente del centro activo enzimático. Estos resultados sugieren que la búsqueda de moléculas bioactivas que mimeticen el efecto de la secuencia c18 sobre calcineurina podría ser una buena estrategia para el desarrollote nuevos fármacos inmunosupresores más seguros que ciclosporina a y fk506.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterizacion de motivos funcionales de rcan1: una proteina reguladora de calcineurina«
- Título de la tesis: Caracterizacion de motivos funcionales de rcan1: una proteina reguladora de calcineurina
- Autor: Anna Aubareda Rodriguez
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 26/02/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Mercé Pérez Riba
- Tribunal
- Presidente del tribunal: joan Serratosa serd?
- María lourdes Arbonés de rafael (vocal)
- anna Bigas salvans (vocal)
- Jesús María no Ureña bares (vocal)