Tesis doctoral de Araceli Beatriz Martín Antonio
En esta tesis se estudia el sistema inmune de la urta (pagrus auriga), dividiendo su estudio en dos partes, el sistema inmune innato (sii) y en el sistema inmune adaptativo (sia). para el estudio del sii, mediante la técnica de hibridación sustractiva supresiva (ssh) se obtuvieron tras inducción con lps (estímulo bacteriano) ests correspondientes a genes expresados diferencialmente debido a este tratamiento. De estos genes obtenidos, se llevó a cabo una selección de 4 relacionados con la respuesta del sii para obtener sus secuencias completas, determinando los elementos conservados y característicos de cada familia y se procedió a estudiar mediante pcr a tiempo real su expresión durante la ontogenia de p. Auriga, su expresión en los distintos órganos de individuos juveniles y su inducción tras tratamiento con lps y la bacteria photobacterium damselae subsp damselae en riñón cefálico analizando la variación temporal de la inducción desde la hora a las 48 horas tras el estímulo. En un experimento similar se estudió igualmente la inducción tras lps a las 3 horas en riñón cefálico, hígado y bazo. Los genes seleccionados para este estudio fueron: la hepcidina, una quimioquina cxc, el factor inhibidor de la migración de macrófagos (mif), y el factor regulador de interferón 1 (irf-1). respecto al estudio del sia, se llevó a cabo la producción de un anticuerpo policlonal contra ig de p. Auriga para su uso en inmunoensayos, para ello se obtuvo y caracterizó la igm de p. Auriga, y mediante western blot y elisa se mostró la reactividad y especificidad del antisuero obtenido en suero de urta e ig purificada. Mediante citometría de flujo se determinaron las poblaciones leucocitarias reconocidas por el antisuero en riñón cefálico, mostrándose también en otros tejidos inmunes (bazo, intestino, branquias y riñón cefalico) el % de células portadoras de ig que reconocía el antisuero. Se determinó mediante western blot y elisa la reactividad cruzada del antisuero en otras especies de peces y por último se mostró la aplicabilidad del antisuero obtenido para ver la respuesta tras vacunación en individuos p. Auriga y en otras especies de peces vacunados con patógenos bacterianos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio del sistema inmune innato y adaptativo en urta (pagrus auriga)«
- Título de la tesis: Estudio del sistema inmune innato y adaptativo en urta (pagrus auriga)
- Autor: Araceli Beatriz Martín Antonio
- Universidad: Cádiz
- Fecha de lectura de la tesis: 08/07/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Manuel Manchado Campaña
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan jose Borrego García
- Carlos Infante toscano (vocal)
- catalina Fernández díaz (vocal)
- José ignacio Navas triano (vocal)