Tesis doctoral de Abdel-aziz Shahein Yasser Ezzat
En esta tesis se presenta: la identificación y clonación del adnc que codifica para el homólogo porcino de la proteína asociada a integrina (iap o cd47), la localización cromosómica del gen correspondiente y la caracterización funcional de dicha molécula. Se generó una sonda molecular específica mediante amplificación por pcr de adnc de lelucocitos porcinos, utilizando cebadores basados en regiones consensus entre las secuencias conocidas de cd47 procedentes de diferentes especies. El rastreo (screening) de una genoteca de adnc de músculo liso de aorta de cerdo identificó seite clones conteniendo todos ellos secuencias idénticas. Los clones comprendían una fase abierta de lectura (orf) que codificaban un péptido señal putativo de 18 aminoácidos, una secuencia de 122 aminoácidos correspondiente a un dominio extracelular de tipo inmunoglobulina variable (igv) seguida por una región de 147 aminoácidos conteniendo cinco dominios que atraviesan la membrana y una cola citoplásmica de 16 aminoácidos. Dicha secuencia de aminoácidos presentaba un 73% de homología con la secuencia humana de iap, por lo que se la denominó iap porcina o cd47 porcino. La rt-pcr mostró que el cd47 porcino se expresa en una gran variedad de tejidos. mediante citometría de flujo, se ha mostrado que el anticuerpo monoclonal bric 126, anti-cd47 humano, reacciona tanto con plaquetas como con células ováricas de hámster chino (células cho) transfectadas con el adnc que codifica para el cd47 porcino. El análisis por western-blot de cd47 de eritrocitos y plaquetas de cerdo reveló un peso molecular de 43-50 kda y de 55-65 kda, respectivamente, en condiciones no reductoras. El cd47 porcino se expresaba de modo estable en las células cho transfectadas y se unía a trombospondina humana (tsp). El anticuerpo bric-126, anti-cd47 humano, inhibía la unión de plaquetas y de células transfectadas con cd47 a tsp humana y a fibrinógeno porcino, en ta
Datos académicos de la tesis doctoral «Clonación y caracterización del antígeno celular porcino cd47«
- Título de la tesis: Clonación y caracterización del antígeno celular porcino cd47
- Autor: Abdel-aziz Shahein Yasser Ezzat
- Universidad: Córdoba
- Fecha de lectura de la tesis: 27/09/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- De Andrés Cara Damián Fermin
- Tribunal
- Presidente del tribunal: diego Llanes ruiz
- angel López carrascosa (vocal)
- José Antonio Barcena ruiz (vocal)
- karin Haverson (vocal)