Tesis doctoral de Elisabet Rodríguez González
La producción in vitro (piv) de embriones caprinos mediante técnicas de maduración, fecundación y cultivo embrionario in vitro (miv-fiv-civ) proporciona un elevado número de embriones utilizables a nivel científico y/o comercial. el objetivo del estudio ha sido seleccionar ovocitos de cabra prepuber y sistemas de maduración in vitro para mejorar la producción in vitro de embriones. Los ovocitos se maduraron en medio tcm199 + piruvato sódico + l-glutamina + gentamicina + 10% suero bovino de machos castrado (ss) + 10 ug/ml lh + 10 ug/ml o-fsh + 1 ug/ml 17beta-estradiol. Tras 27h de miv, los ovocitos se inseminaron con semen fresco (3.5×10 espermatozoides/ml) en medio talp suplementado con 1 ug/ml de hipotaurina. A las 24 h post-inseminación, se cultivaron en medio sofm y se mantuvieron 7 días en cultivo. en el estudio 1, se evaluó la utilidad del test de azul de cresol brillante (bcb) para seleccionar los ovocitos de cabras prepúberes. Los ovocitos bcb+ (ovocitos con citoplasma coloreado de azul, crecimiento finalizado) presentaron un mayor diámetro (136.6 +- 6.3 um; p<0,001) y mayores tasas de maduración nuclear (81.4%; p<0,05), fecundación normal (23.5%; p<0,0001) y desarrollo más allá del estadio de 8 células (41.3%; p<0,001) y de mórulas más blastocistos (12.00%; p<0,05) que los ovocitos no coloreados de azul. en el estudio 2, se utilizó el factor de crecimiento epidémico (egf), para la maduración in vitro. Para ello, se comparó un medio suplementado con hormonas (lh, fsh, 17beta-estradiol) y suero (ss o fcs) con un medio sumplementado con 10 ng de egf en ausencia de suero y hormonas. El porcentaje de ovocitos fecundados de forma normal fue inferior (p<0,05) cuando se empleó egf (17.3%) que ss (ss: 27.2%; fcs: 29.0%). Las tasas de embriones totales (71.5%) y de embriones que superaron el estadio de 8 células (26.2%) fueron superiores (p<0.05) al emplear ss y hormonas en el medio de mad
Datos académicos de la tesis doctoral «Producción in vitro de embriones caprinos: sistemas de maduración citoplasmática de ovocitos de hembras prepúberes«
- Título de la tesis: Producción in vitro de embriones caprinos: sistemas de maduración citoplasmática de ovocitos de hembras prepúberes
- Autor: Elisabet Rodríguez González
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 20/12/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Paramio Nieto M. Teresa
- Tribunal
- Presidente del tribunal: francesca Vidal
- Fernando López gátius (vocal)
- begoña Aguilar (vocal)
- pedro Lorenzo (vocal)