Tesis doctoral de Sanz Ezquerro Juan Jose
Durante los intentos de optimizacion de un sistema de reconstitucion in vivo de la transcripcion-replicacion del virus de la gripe observamos un efecto toxico asociado a la expresion de la subunidad pa de la replicasa viral. la caracterizacion de este efecto permitio observar que es generalizado y que es independiente de la expresion de otras proteinas del virus de la gripe, del sistema de expresion y de la linea celular empleados; afecta a proteinas virales y celulares, tiene una cinetica de aparicion rapida y no requiere la sintesis de novo de proteinas. El nivel molecular al que actua es post-traduccional, induciendo la proteolisis de las proteinas que se coexpresan con pa. Los datos son compatibles tanto con la existencia de una actividad proteasa en pa como con la induccion de un sistema proteolitico celular estable. Este efecto inductor de proteolisis podria estar relacionado con la induccion de apoptosis mediada por el virus de la gripe. Mediante el mapeo de las regiones de la proteina implicadas en este proceso hemos podido comprobar que el tercio amino-terminal de pa es suficiente para la induccion de proteolisis, y que su localizacion nuclear podria ser un requisito indispensable para este efecto. Esta region amino de la proteina es dispensable para su interaccion con la subunidad pb1. por otro lado, la aparicion de isoformas de pa in vivo y su capacidad de ser fosforilada in vitro sugieren que pa podria ser una fosfoproteina. por ultimo, se ha identificado mediante un sistema de doble-hibrido una secuencia humana capaz de interaccionar con pa, y se esta caracterizando la posible relevancia funcional de esta interaccion mediante experimentos bioquimicos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Analisis funcional de la subunidad pa de la polimerasa del virus de la gripe. caracterizacion de una actividad inductora de proteolisis.«
- Título de la tesis: Analisis funcional de la subunidad pa de la polimerasa del virus de la gripe. caracterizacion de una actividad inductora de proteolisis.
- Autor: Sanz Ezquerro Juan Jose
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1997
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Amelia Nieto Martin
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan Antonio Garcia Alvarez
- José Manuel Cuezva Marcos (vocal)
- Margarita Del Val Latorre (vocal)
- Ignacio Moriyon Uria (vocal)