Tesis doctoral de Berta Perez Burkhardt
Las bases moleculares de la perdida de expresion de los antigenos hla explican los diferentes mecanismos que utilizan las celulas para escapar del sistema inmune. La molecula hla de clase i es una unidad funcional trimerica compuesta por la cadena pesada, la beta-2 microglobulina y el peptido antigenico. Ademas de los diferentes fallos que se pueden producir en esta molecula, existen otros posibles fallos que pueden originar la perdida de expresion de los antigenos hla de clase i. La linea celular mz2-mel 2.2 no recupera la expresion de locus a tras la induccion con gamma ifn. Tras inmunoprecipitar con el anticuerpo monoclonal w6/32 las lineas mz2-mel ebv y 3.0, ademas de las lineas daudi y k562, se concluyo con la perdida de los antigenos hla-a29, asi como hla-b44. tras la tipificacion genomica se cuantifico la deleccion, que ocupaba la region hla completa. Se realizo un cariotipo a partir del cual se observo la perdida de un cromosoma 6 completo. Por tanto la linea celular mz2-mel 2.2 ha perdido la expresion de antigenos de hitocompatibilidad de clase i por perdida de un haplotipo completo por perdida de un cromosoma 6. La linea celular m-34 no expresa moleculas de clase i. La tipificacion por citometria revelo un patron de respuesta negativo frente a los anticuerpos monoclonales w6/32, y grh1. Tras la induccion con gamma-inf, no se recupero la expresion de estas moleculas. Ensayos de inmunohistoquimica pusieron de manifiesto la presencia de cadena pesada intracitoplasmatica, y defecto de beta-2 microglobulina. la inmunoprecipitacion revelo la presencia de una banda de 45 kd correspondiente a la cadena pesada. Se realizo una amplificacion de la beta-2 microglobulina comprobandose la presencia del gen; asi pues mediante la tecnica de la rt-pcr se obtuvo un amplificado de 415 pb correspondiente al transcrito de la beta-2 microglobulina. Para comprobar si habia translacion a proteina se secuencio esta proteina, obteniendo como
Datos académicos de la tesis doctoral «Bases moleculares de la perdida de expresion de antigenos de histocompatibilidad en lineas celulares de melanoma.«
- Título de la tesis: Bases moleculares de la perdida de expresion de antigenos de histocompatibilidad en lineas celulares de melanoma.
- Autor: Berta Perez Burkhardt
- Universidad: Granada
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1996
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Miguel Angel López Nevot
- Tribunal
- Presidente del tribunal: David Aguilar Peña
- Antonio Núñez Roldán (vocal)
- Salvio Serrano Ortega (vocal)
- Abelardo Caballero Gonzalez (vocal)