Tesis doctoral de Bruno Gonzalez Zorn
El patógeno de rumiantes listeria ivanovii se diferencia de listeria monocytogenes en que produce una fuerte hemolisis bizonal y una caracteristica reaccion de hemolisis cooperativa (tipo camp) en forma de pala con rhodococcus equi. hemos clonado el gen responsable de las propiedades hemolíticas diferenciales de l.Ivanovii,smcl, que codifica una smasa c similar (>50% de identidad) a las esfingomielinasas c de staphylococcus aureus (b-toxina), bacillus cereus y leptospira interrogans. Smcl se transcribe de forma monocistrónica y su expresión es independiente de prfa. Southern blots de baja especificidad han demostrado que, dentro del genero listeria, smcl esta presente solamente en l.Ivanovii. Hemos construido un mutante nuloen smcl. Su fenotipo en agar sangre de oveja es identico al de l.Monocytogenes (i.E. Debilmente hemolítico y sin reaccion tipo camp con r.Equi). Este mutante nulo en smcl. su fenotipo en agar sangre de oveja es identico al de l.Monocytogenes (i.E. debilmente hemolítico y sin reaccion tipo camp con r.Equi). Este mutante es menos virulento en el modelo murino, y su capacidad de proliferacion intracelular en las celulas epitelioides bovinas mdbk esta disminuida. se investigó el papel de smcl en la supervivencia intracelular utilizando un mutante de l.Monocytogenes que no poseia los determinantes membranolíticos hly, plca y plcb que es, por tanto, incapaz de proliferar en el interior de las celulas. La complementacion de este mutante con smcl en un plasmido fue suficiente para promover su multiplicacion intracelular en las celulas mdbk . Mediante microscopia electronica de trasmisión demostramos que smcl contribuye a la disrupcion de la vacuola fagocítica y el escape de la bacteria al citoplasma celular. Por tanto, l.Ivanovii posee una tercera fosfolipasa membranoactiva que, conjuntamente con plca y plcb, podria actuar en concierto con la toxina formadora de poros hly para facilitar el escape de la bacteria de
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterizacion genetica y papel en la patogenesis de smcl, una esfingomielinasa c de listeria ivanovii«
- Título de la tesis: Caracterizacion genetica y papel en la patogenesis de smcl, una esfingomielinasa c de listeria ivanovii
- Autor: Bruno Gonzalez Zorn
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 19/11/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- José Antonio Vazquez Boland
- Tribunal
- Presidente del tribunal: guillermo Suarez fernandez
- Francisco Garcia del portillo (vocal)
- Fernando Baquero mochales (vocal)
- klaus Brehm (vocal)