Tesis doctoral de María Soler Nuñez
Este trabajo se enmarca dentro de una linea de investigacion encaminada al estudio de la ruta de transduccion de señales que controla el mantenimiento de la integridad celular en la llevadura saccharomyces cerevisiae. Uno de los elementos de esta ruta es la map quinasa slt2, la cual, mediante estudios geneticos de epistasis habia sido previamente situada tras las mapkks redundantes denominadas mkk1. Y mkk2. En el estudio presentado de demustra la existencia de una interaccion directa entre cada una de dichas proteinas y slt2, tanto mediante la utilizacion del sistema de «dos hibridos» que permite la deteccion de asociaciones de proteinas in vivo, como mediante tecnicas de copurificacion in vitro. se han caracterizado ademas los dominios proteicos que intervienen en esta interaccion, que es fuerte e independiente del estado de activacion de la ruta. concretamente las mapkks interaccionan mediante su dominio n-terminal regulatorio con la region catalitica n-terminal de slt2. El extremo c-terminal no catalitico de esta ultima proteina, que incluye una region poliglutaminica dispensable para su funcionalidad, posee un dominio criptico de activacion de la transcripcion que se pone de manifiesto en el ensayo de «dos hibridos» cuando la proteina completa o un fragmento proteico que incluye dicha region se fusiona a un dominio de union a dna. Mediante tecnicas inmunologicas se ha establecido que tanto mkk1 como mkk2 se encuentran exclusivamente en el citoplasma, mientras que slt2 presenta ademas una localizacion nuclear. Mediante mutagenesis dirigida se ha obtenido y estudiado un alelo mutante inactivo de slt2 al sustituir los aminoacidos fosfoaceptores del dominio de activacion, demostrandose la esencialidad de dichos residuos para la funcionalidad de la proteina. El estudio de la letalidad causada por la sobreexpresion de un alelo hipercactivo de pkc1 ha demostrado que no es debida a una activacion permanente de slt2, ni tampoco a u
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterizacion molecular y funcional de las interacciones de la map quinasa slt2 con otros elementos de la ruta de señalizacion que controla la integridad celular de saccharomyces cerevisiae.«
- Título de la tesis: Caracterizacion molecular y funcional de las interacciones de la map quinasa slt2 con otros elementos de la ruta de señalizacion que controla la integridad celular de saccharomyces cerevisiae.
- Autor: María Soler Nuñez
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1997
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- César Nombela Cano
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Miguel Sanchez Perez
- Francisco Rey Iglesias (vocal)
- Tomás González Villa (vocal)
- María Fernandez Lobato (vocal)