Clonación del gen dsba de salmonella typhi y salmonella enteritidis y caracterización fenotípica resultante de su inactivación

Tesis doctoral de Mendoza Del Cueto M. Teresa

Dsba es una proteína que pertenece a la familia enzimática trx de tiol-disulfuro óxido-reductasas, localizada en el periplasma bacteriano, y catalizadora de puentes disulfuro. La formación de estos puentes disulfuro es importante para la adquisición de una conformación estable y activa de un número de proteínas extracitosólicas, entre las que se incluyen factores relacionados con la virulencia de bacterias como escherichia coli, shigella flexneri o vibrio cholerae. previamente, en nuestro laboratorio se habían descrito tres genes de salmonella (dlp, en el plásmido de virulencia de s.Enteritidis, dlt y del en el cromosoma de s.Typhi y de s.Enteritidis, respectivamente) cuyos productos tienen la secuencia cys-xaa-xaa-cys característica de las proteínas de la familia trx, pero que daba su baja homología (33%) con dsba suponíamos que no correspondían con el alelo de dicho gen. Posteriormente, hemos conseguido clonar los genes dsba de s.Typhi y de s.Enteritidis, los cuales presentan una homología del 83% con dsba de e.Coli. Así mismo hemos comprobado que estos genes de salmonella son capaces de complementar las deficientes fenotípicas descritas en el mutante dsba::kan (ss140) de e.Coli, en cuanto a la disminución de la actividad fosfatasa alcalina y glucosa-1-fosfatasa, crecimiento en presencia de sales de cadmio y zinc, formación de biofilm y, parcialmente, la sensibilidad a dtt 10 mm. Por otra parte, hemos interrumpido del gen dsba de las cepas 5866 de s.Typhi y 366 de s.Enteritidis (que carece de plásmido de virulencia), observando que estos mutantes presentan una disminución en la capacidad invasiva y adhesiva en células epiteliales (henle-407) y en la supervivencia en macrófagos (u-937). La disminución en la invasión y adhesión en henle-407 es complementada totalmente por los genes dsba y delp en bajo número de copias; sin embargo la menor supervivencia en u-937 sólo es complementada parcialmente por estos ge

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Clonación del gen dsba de salmonella typhi y salmonella enteritidis y caracterización fenotípica resultante de su inactivación«

  • Título de la tesis:  Clonación del gen dsba de salmonella typhi y salmonella enteritidis y caracterización fenotípica resultante de su inactivación
  • Autor:  Mendoza Del Cueto M. Teresa
  • Universidad:  Complutense de Madrid
  • Fecha de lectura de la tesis:  24/04/2002

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Rafael Rotger Anglada
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: josé Martínez peinado
    • García de los ríos José (vocal)
    • María aurora Echeita sarrionandia (vocal)
    • Usera gonzález Miguel ángel (vocal)

 

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