Tesis doctoral de Neus Fernandez Troy
En este trabajo se pone de manifiesto la importancia que pueden tener los mecanismos de control posttranscripcional en la expresion de gm-csf durante la activación de linfocitos t y de tnf-a durante la activacion de monocitos humanos y en el proceso de diferenciacion a macrófagos. En la primera parte se ha puesto a punto un sistema para medir media de rna basado en el operón de resistencia a la tetraciclina de e.Coli. Se utilizan dos plasmidos. uno codifica una proteina de fusion que actuara como un transactivador, formada por el dominio de activacion de la transcripción de la proteina vp16 de herpes simplex. El segundo plásmido contiene un gen reporter controlado por el promotor de b-actina y por siete secuencias del operon (teto). Cuando los dos plasmido se expresan en una misma celula, el transactivador se une a las secuencias teto y activa la transcripcion del gen reporter. En presencia de tetraciclina, esta se une al tetr, cambiando su conformacion e impidiendo su union al promotor, con lo que la transcripcion queda reducida a niveles minimos determinados por el promotor de b-actina. Se ha demostrado que es un sistema altamente especifico, ya que permite el bloqueo unicamente de la transcripcion del gen que se este estudiando sin afectar al metabolismo general de la celula. Mediante la utilizacion de esta tecnica se ha demostrado que el are de la 3¿utr del mrna de gm-csf, aunque es necesario para mantener su corta vida media, no es suficiente para inducir el aumento de vida media en respuesta a la coestimulacion por cd28, en celulas jurkat. En la segunda parte se ha estudiado la expresion de tnf-a en respuesta a la activacion de monocitos humanos por tsst-1 regula la traduccion de tnf-a en monocitos humanos, ya que causa un desplazamiento de su mrna hacia fracciones polisomales y aumenta la tasa de sintesis de la proteina tnf-a. Ademas, se ha observado que la activacion por lps modula de forma diferente la produccion de tnf-a por
Datos académicos de la tesis doctoral «Control postranscripcional de la expresion de citocinas durante la activacion y diferenciacion de celulas del sistema inmunitario.«
- Título de la tesis: Control postranscripcional de la expresion de citocinas durante la activacion y diferenciacion de celulas del sistema inmunitario.
- Autor: Neus Fernandez Troy
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 12/07/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Enric Espel Masferrer
- Tribunal
- Presidente del tribunal: pilar Lauzurica gómez
- José Alberto García sanz (vocal)
- cándido Juárez rubio (vocal)
- oscar De la calle martin (vocal)